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二氢杨梅素联合依托泊苷对绒毛膜癌细胞JAR的抑制作用
目的 探讨二氢杨梅素(DMY) 联合依托泊苷(VP16) 对绒毛膜癌细胞JAR的抑制作用及其相关机制.方法 体外培养JAR细胞,设空白对照组、DMY组、VP16组以及DMY与VP16联合(DMY + VP16) 组.MTT法检测各组细胞增殖情况;Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术分析各组细胞的凋亡率;克隆形成实验检测细胞生存能力;Western blotting法检测凋亡抑制蛋白Bcl-2、细胞凋亡抑制蛋白2(c-IAP2) 表达水平.结果 MTT检测结果显示,与空白对照组比较,DMY组、VP16组及DMY + VP16组在24 h和48 h时间点的细胞存活率均下降,且DMY+ VP16组细胞存活率下降为明显;Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术结果显示,与对照组相比各实验组凋亡率均有增高,DMY + VP16组凋亡率明显高于各单独用药组;克隆形成实验结果显示,对于JAR细胞,实验组的克隆球数目均少于对照组,且DMY + VP16组克隆球数目少;对于正常肝脏HL7702细胞,DMY组与对照组相比无明显差异,VP16组与DMY + VP16相比亦无明显差异;Western blotting实验结果显示,与对照组相比,无论DMY和VP16单独还是联合使用均可下调Bcl-2、c-IAP2蛋白表达,同时DMY + VP16组下调作用明显.结论 二氢杨梅素联合依托泊苷明显增强对绒毛膜癌细胞JAR的生长抑制作用,联合使用可以减少化疗药物VP16的用量,其抑制肿瘤细胞作用可能与下调Bcl-2、c-IAP2蛋白的表达有关.
