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  • 狂犬病毒CVS-N2c毒株糖蛋白基因的克隆和重组腺病毒的构建

    作者:张云;李文辉;王树惠;刘力;杨帆

    克隆了狂犬病毒CVS-N2c毒株糖蛋白(GP)基因,并进行了GP全基因序列测定和对比分析.结果显示CVS-N2c GP基因编码区长1575bp,编码524个氨基酸,与国内外发表的狂犬病毒疫苗株3aG株、ERA株、和HEP-Flury株GP基因的核酸序列同源性分别为89.0%,89.3%,94.5%,而推导的氨基酸序列同源性分别为87.6%、88.4%、和91.2%.在此基础上,用pAdEasy载体系统构建了表达GP基因的重组腺病毒.电镜下确定重组病毒颗粒的直径约70nm,Western blot 显示重组病毒表达的GP 蛋白可被兔抗狂犬病毒血清识别,表达的GP 蛋白分子量约为66kD,与天然的狂犬病毒GP的分子量相符.该表达CVS-N2c毒株GP基因的重组腺病毒是筛选有效狂犬病毒基因工程疫苗的基础.

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