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重组腺病毒Ad-ING4和Ad-PTEN抑制肝癌细胞增殖
目的 用构建好的重组腺病毒Ad-ING4和Ad-PTEN感染人肝癌SMMC-7721细胞,检验其对细胞的作用.方法 用构建好的重组腺病毒Ad-ING4和Ad-PTEN感染QBI-293A细胞,对病毒进行扩增并测定其效价,荧光显微镜下观察感染效果.用扩增得到的Ad-ING4和Ad-PTEN感染SMMC-7721细胞,流式细胞术及MTT检测作用效果.结果 空腺病毒组的凋亡率为3.4%±1.3%,Ad-ING4组和Ad-PTEN组分别为49.7%±4.8%和11.4%4±3.2%,均显著高于空腺病毒组(P<0.01);Ad-ING4组和Ad-PTEN组的细胞增殖在48~96 h时较正常组明显下降(P<0.05).结论 Ad-ING4和Ad-PTEN对SMMC-7721细胞均有显著抑制作用,尤其是Ad-ING4.
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Ad-ING4抑制人A549肺癌细胞及其裸鼠移植瘤的生长
目的 研究腺病毒介导的ING4基因(Ad-ING4)对肺癌体内外的抑制作用及其潜在的分子机制.方法 体外采用50 MOI的Ad-ING4感染A549肺癌细胞,并用MTT法检测Ad-ING4对A549细胞的抑制作用,流式细胞仪检测肿瘤细胞的凋亡率.采用A549细胞株建立人肺癌裸鼠模型,瘤体局部注射干预用药,每隔5天测量一次肿瘤体积,并计算瘤重抑瘤率;瘤块免疫组化检测ING4、生存素(survivin)、CD34、HIF-1等基因的表达.结果 Ad-ING4感染A549细胞抑制率可达47.62%;72 h凋亡率为18.5%;荷瘤裸鼠经治疗后,Ad-ING4组和顺铂(DDP)组的肿瘤体积、瘤重均明显缩小,其抑瘤率分别达到42.43%和46.47%,DDP组出现不良反应;免疫组化检测Ad-ING4组和DDP组与对照组比较,生存素、CD34、HIF-1的表达下调(P<0.01).结论 Ad-ING4对人A549肺癌细胞及其裸鼠移植瘤的生长具有明显的抑制作用.其抑瘤机制可能与下调生存素、CD34、HIF-1的基因表达进而诱导肿瘤细胞凋亡和抑制肿瘤血管形成等有关.