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流式细胞术检测细胞凋亡比较研究
从三方面探讨检测细胞凋亡流式细胞术的方法.选用大鼠皮质神经元细胞,同时使用碘化丙锭(PI)An-nexin V/PI.JC-1法检测细胞凋亡率.结果显示三种方法的凋亡率分别是:2.60%,6.52%和18.56%,两两之间有显著性差异(P＜0.01).JC-1法敏感,AV/PI次之,PI单染法不适合检测早期细胞凋亡.
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流式细胞术在细胞活率检测中的应用
目的探讨流式细胞术在细胞活率检测中的应用.方法测试管中用CD45-PerCP单抗标记动员后采集物中的单个核细胞,用碘化丙锭(PI)染色其中死亡的细胞.对照管中不加PI,其余与测试管相同.结果(1)随着温育时间的延长,PI拒染率逐渐降低,温育时间以15 min为宜.(2)PI拒染率与台盼蓝拒染率呈显著正相关(r=0.998);其精密度优于台盼蓝拒染试验.结论流式细胞术适用于细胞活率的检测.
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荧光染色技术检测细胞杀伤能力
目的:用羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酶(CFSE)及碘化丙锭(propidium iodide,PI)两种荧光染料标记方法检测小鼠脾细胞杀伤能力.并探讨其应用价值.方法:采用CFSE标记靶细胞,PI标记被杀伤细胞,并通过直接杀伤实验和双向杀伤实验验证方法可行性.分离各组C57BL/6小鼠脾细胞作为攻击细胞.Balb/c小鼠脾细胞经5μmol/LCFSE染色后作为靶细胞.将攻击细胞与靶细胞按20:1的比例混合,培养6 h后用Pl染色10 min,经流式细胞术分析.比较Balb/c小鼠脾细胞致敏C57BL/6小鼠组(免疫组)和地塞米松处理组的脾细胞杀伤能力.结果:CFSE及PI两种荧光染色细胞可以在流式细胞仪上明显区分.CFSE和Pl双阳性细胞是被杀伤的靶细胞.免疫组与地塞米松处理组的杀伤能力差异存在显著性(P<0.05).结论:CFSE与PI两种荧光染料染色的杀伤实验方法操作简单、方便.有良好的应用价值.
