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左归丸促进骨髓形成肝细胞的分子机制研究
目的:探讨左归丸促进骨髓形成肝细胞的分子机制.方法:采用交叉性别骨髓移植模型,雌性BALB/c小鼠接受9.0Gy60Co源γ射线照射后,经尾静脉注射输入同种系雄性小鼠骨髓细胞,分左归丸组和模型组,6个月后处死实验动物,取肝组织标本.选用小鼠基因表达谱寡核苷酸芯片,观察实验小鼠肝组织基因表达谱的变化.结果:左归丸组小鼠在骨髓移植6个月后肝组织的基因表达谱与模型组比较有显著不同,差异表达基因有1147条,已知功能基因有533条,其中上调基因264条,下调基因269条.结论:左归丸可能是通过影响肝组织基因表达谱的变化促进骨髓形成肝细胞.
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蛋白酶体抑制剂PS-341靶向干预多发性骨髓瘤骨髓间充质干细胞的实验研究
目的:分析蛋白酶体抑制剂PS-341对多发性骨髓瘤(MM)骨髓间充质干细胞(MSCs)凋亡及其对IL-6、IL-1β、SCF细胞因子表达的影响.方法:含10%FBS的1640培养液培养得到MSCs,流式细胞术(FCM)鉴定所培养细胞的表型,以终浓度分别为0 nmol/L、50 nmol/L、100 nmol/L、150 nmol/L、200 nmol/L的PS-341作用MSCs 4 h,光学显微镜观察细胞形态改变,荧光显微镜下Annexin V-FITC/PI双染法观察细胞凋亡,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测IL-6、IL-1β、SCF细胞因子表达的变化.结果:PS-341可诱导MSCs凋亡,与其浓度成正比;与对照组(0 nmol/L PS-341)比较,浓度分别为50 nmol/L、100 nmol/L、150 nmol/L、200 nmol/L的PS-341作用MSCs 4 h后明显抑制IL-6、IL-1β、SCF的表达(P＜0.05);PS-341对IL-6和SCF的抑制与PS-341浓度成正相关(P＜0.05),在初发/难治复发和完全缓解(CR)两组患者间均无显著差异;对IL-1β的抑制在CR组较初发/难治复发组更明显(P＜0.05);PS-341作用后IL-1β表达的强弱对IL-6及SCF的表达无影响.结论:PS-341诱导MM患者MSCs凋亡和抑制其IL-6、IL-1β、SCF的表达,是PS-341有效治疗MM的靶点之一.
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中药及复方对骨髓基质细胞影响的研究进展
中药治疗骨折在我国已有数千年历史,具有很好的疗效.近年来随着对干细胞研究的深入,已经认识到骨折愈合与骨髓基质细胞的成骨分化有着密切的联系.因此中药治疗骨折与其对骨髓基质细胞的影响有很大的关系.现将目前中药及复方对骨髓基质细胞影响的研究进展综述如下.
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中药诱导大鼠骨髓间质干细胞分化的实验
背景:体外定向诱导分化可使骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)转化为成骨细胞、脂肪细胞、软骨、肌肉细胞、神经元样细胞等,而中药是否能对大鼠骨髓间质干细胞有诱导分化作用呢?目的:研究SD大鼠MSCs体外扩增培养及用中药定向诱导分化为神经元样细胞的功效.设计:以细胞为研究对象,重复观察测量,探索性研究.单位:一所医学院病理生理学教研室.材料:实验用骨髓取自经检验健康的SD雄性大鼠.方法:通过贴壁法分离大鼠MSCs,体外扩增培养,流式细胞仪检测其表面抗原表达,多种中药成分定向诱导MSCs分化为神经元样细胞.光镜下观察细胞形态,免疫细胞化学法检测神经细胞特异性抗原标志.主要观察指标:①MSCs分离和扩增结果.②MSCs表面抗原及神经元样细胞鉴定结果.结果:大鼠MSCs可通过贴壁法成功分离并可在体外大量扩增.流式细胞仪检测结果显示CD14,D11α,D34,D38,D45,D80,D86为阴性,D29,D44,D90,D105,D166呈阳性.黄芪、天麻、人参、当归、脑新舒、人参蜂王浆等多种中药诱导1～3 h后大部分MSCs转变为神经元样细胞,出现胞体和突起,免疫细胞化学染色神经元特异性烯醇酶、巢蛋白呈阳性,胶质纤维酸性蛋白阴性.结论:SD大鼠骨髓间质干细胞是具多向分化潜能的细胞,具有较强的增殖、自我更新能力.在适宜的诱导条件下,可以分化为神经元样细胞.
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小叶女贞对小鼠骨髓细胞增殖和IL-1的影响
目的:从免疫学方面探讨小叶女贞对小鼠骨髓细胞增殖反应和IL-1的影响.方法:用100%小叶女贞液定期给小鼠连续灌胃15d,1次/d,检测小鼠骨髓细胞增殖反应和IL-1的水平.结果:小叶女贞对以上两项免疫学指标均有明显增强作用,与对照组相比均有非常显著性差异(P＜0.01).结论:小叶女贞可促进小鼠骨髓细胞增殖反应和IL-1的分泌.
关键词： 小叶女贞/药理学 骨髓细胞/药物作用 白细胞介素1/药物作用 小鼠 -
体外诱导人骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化
目的探索在体外诱导人骨髓间充质干细胞(hMSC)向心肌细胞分化的方法.方法以5-杂氮胞苷(5-Aza)对hMSC诱导,利用结蛋白抗体、房性利钠肽抗体以及闰盘蛋白抗体进行免疫组化染色,并进行超薄切片透射电镜观察.结果经反复多次传代后,细胞形态及抗原表达无改变,始终保持未分化状态和稳定扩增.利用5-Aza对其诱导后第2周始,免疫组化染色发现细胞结蛋白、闰盘蛋白以及房性利钠肽表达均为阳性,不同浓度5-Aza诱导组之间差异无显著性.电镜观察发现这些细胞具有心肌细胞的特点.结论在体外利用5-Aza可以诱导hMSC向心肌细胞分化.
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袁氏生脉成骨胶囊对激素诱导骨髓基质细胞成脂分化的拮抗作用
[目的]观察中药袁氏生脉成骨胶囊(主要由丹参、川芎、鸡血藤、黄芪组成)对激素诱导骨髓基质细胞成脂分化的拮抗作用,探讨袁氏生脉成骨胶囊防治激素性股骨头坏死的病理机制.[方法]采用骨髓细胞体外培养技术和血清药理学方法,分离培养大鼠骨髓基质细胞;地塞米松诱导骨髓基质细胞的成脂分化,以含中药血清作为拮抗剂.检测培养细胞的甘油三酯含量和碱性磷酸酶活性.[结果]分离细胞培养4 d后可以观察到大量成骨细胞、成纤维细胞、破骨细胞;模型组加入地塞米松造模;成骨胶囊药物组地塞米松用法同模型组,同时加入含药血清.6 d后,光镜下观察成骨胶囊药物组见少量脂肪细胞,模型组脂肪细胞明显增多.成骨胶囊药物组碱性磷酸酶活性高于模型组(P＜0.05);甘油三酯含量低于模型组(P＜0.01).[结论]中药袁氏生脉成骨胶囊能够有效拮抗激素诱导骨髓基质细胞成脂分化.提示活血化瘀类中药防治股骨头坏死的机理不仅是改善了股骨头的微循环,而且抑制了骨髓基质细胞成脂分化,增加了成骨细胞的表达.
