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白头翁汤正丁醇提取物对热带念珠菌毒力因子的影响
目的:探讨白头翁汤正丁醇提取物butyl alcohol extract of Baitouweng decoction,BAEB对热带念珠菌(Candida tropicalis)毒力因子细胞表面疏水性、菌丝及生物膜形成的影响.方法:采用微量稀释法测定BAEB对热带念珠菌的低抑菌浓度(MIC);XTT还原法测定BAEB对热带念珠菌生物膜抑制作用(SMIC80),Time-Kill法检测BAEB对热带念珠菌活菌数的动态影响;水-烃两相法测定BAEB对热带念珠菌细胞表面疏水性(cell surface hydrophobicity,CSH)的影响;荧光显微镜观察BAEB对热带念珠菌菌丝形态的影响;扫描电镜观察BAEB对热带念珠菌生物膜形态的影响;激光共聚焦显微镜检测BAEB对热带念珠菌生物膜荧光信号强度的影响;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测菌丝及生物膜相关基因UME6,NRG1,ALST3的表达量变化.结果:BAEB对9株热带念珠菌的MIC在64～128 mg· L-1,对热带念珠菌生物膜的SMIC80为256～512 mg·L-1,FLZ对热带念珠菌的MIC在1～1 024 mg·L-1,SMIC80为1024mg· L-1或以上,Time-Kill曲线显示256,512 mg·L-1BAEB具有明显的杀菌作用,CSH实验显示128,256,512 mg·L-1BAEB均能够降低其表面疏水性,SEM观察到512 mg·L-1 BAEB能够有效抑制热带念珠菌在硅胶导尿管上生物膜完整度,CLSM显示256,512 mg· L-1BAEB可以明显降低生物膜荧光信号强度,qRT-PCR检测显示在256,512 mg·L-1BAEB作用下,ALST3,UME6基因表达量显著下调,NRG1无明显变化.结论:BAEB可以抑制热带念珠菌细胞表面疏水性、菌丝及生物膜形成等毒力因子.
关键词： 白头翁汤正丁醇提取物(BAEB) 热带念珠菌 菌丝 细胞表面疏水性 生物膜 -
黄连解毒汤醋酸乙酯提取物对白色念珠菌毒力因子的作用
目的 探讨黄连解毒汤醋酸乙酯提取物(ethyl acetate extract of Huanglianjiedu Decoction,EAHJD)对白色念珠菌毒力因子的作用.方法 分别采用卵黄培养基法检测磷脂酶(PL)活力、牛奶平板法检测天冬氨酸蛋白酶(Sap)活力、橄榄油乳化法检测脂肪酶(Lip)活力;水-烃两项测定实验检测细胞表面疏水性(CSH); RT-PCR法检测毒力因子相关基因的表达.结果 EAHJD对PL的活力无影响;1 250 μg/mL EAHJD可显著抑制Sap与Lip的活力,312 μg/mL EAHJD效果次之;EAHJD对CSH呈现剂量依赖性抑制,CSH1分别下调了7.69、3.57、2.95倍;分泌型酶相关基因在EAHJD作用下呈现不同倍数的变化,其中PLC1、Sap2、Sap3、Sap9、Lip3、Lip4、Lip6下调,PLB1、PLC2、Sap10、Lip5无明显变化.结论 EAHJD可抑制白色念珠菌毒力因子的活力.
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白念珠菌粘附上皮细胞的机制
本文总结了近年来白念珠菌细胞表面疏水性、侵蚀性酶，以及表面甘露糖、蛋白质等对上皮细胞粘附的研究进展，提出了阻断白念珠菌粘附的方式。
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蒺藜中甾体皂苷TTS-12对白念珠菌生物被膜形成的抑制作用
目的 观察蒺藜甾体皂苷类化合物TTS-12对白念珠菌生物被膜形成的影响,探讨其可能的作用机制.方法 采用激光共聚焦显微镜观察TTS-12对白念珠菌生物被膜生长形态的影响;采用XTT法考察不同浓度TTS-12对白念珠菌生物被膜形成的影响;应用光密度值测定及实时定量RT-PCR(real-time RT-PCR)法考察不同浓度TTS-12对白念珠菌细胞表面疏水性(cell surface hydrophobicity,CSH)及相关基因表达的影响.结果 与未加TTS-12的正常对照细胞相比,经TTS-12处理的白念珠菌生物被膜结构疏松,TTS-12可剂量依赖性地抑制白念珠菌生物被膜的形成,其生长动力学及细胞表面疏水性值下降,CSH1基因表达水平降低(P<0.01).结论 TTS-12可能通过降低白念珠菌CSH1基因表达来抑制白念珠菌生物被膜的形成.
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血链球菌细菌素对念珠菌细胞表面疏水性和细胞膜钙离子通透性的影响
目的:研究血链球菌细菌素对单独及混合培养的白色念珠菌(C.a)及热带念珠菌(C.t)细胞表面疏水性的影响.研究血链球菌细菌素对单独及混合培养的白色念珠菌(C.a)及热带念珠菌(C.t)细胞膜钙离子通透性的影响.方法:复苏并传代血链球菌标准株ATCC10556,通过低温高速离心,细胞破碎等方法提取血链素,使其作用于1×106 cfu/mL单独及混合培养的C.a及C.t,于37℃,80 r/min振荡培养.1)采用二倍稀释法,测定血链素对C.a及C.t小抑制浓度(MIC);2)运用微生物黏着碳氢化合物的方法[1],用紫外分光光度计测A值,计算C.a及C.t的疏水率;3)分别向单独及混合培养的C.a及C.t菌悬液中装载钙离子荧光探针(Fluo-3 AM),利用激光共聚焦显微镜观察血链素作用后的C.a及C.t细胞内钙离子浓度的变化.结果:血链素对单独培养的C.a及C.t的MIC为0.25 g/L;血链素对等量混合培养的C.a及C.t的MIC为0.5 g/L.2)血链素作用后,单独及混合培养的C.a及C.t细胞表面疏水率均明显降低,与对照组相比具有显著差异(P＜0.05).在血链素的作用下,单独及混合培养的C.a及C.t的细胞内钙离子浓度均明显降低,与对照组相比具有统计学意义(P＜0.05).结论:血链素可以导致白色念珠菌及热带念珠菌细胞表面疏水性降低.血链素可以导致白色念珠菌及热带念珠菌细胞膜钙离子通透性增强.
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柠檬精油、柠檬烯、茶多酚对变形链球菌表面疏水性及黏附的影响
目的：研究天然植物成分柠檬精油（LEO）、柠檬烯（LIM）及茶多酚（TP）对变形链球菌（S．mutans）细菌表面疏水性及黏附能力的影响。方法：取小抑菌浓度（MIC）以下浓度作为实验浓度；采用微生物黏着碳氢化合物法（MATH），测定 S．mu-tans 表面疏水性；采用96孔板结晶紫染色法，评价 S．mutans 的黏附。结果：LEO、LIM、TP 在低于小抑菌浓度（MIC）时，对S．mutans 表面疏水性及粘附具有抑制作用；在一定范围内其抑制作用随浓度增大而逐渐增加（P ＜0．05）；1／2 MIC 和1／20 MIC 时 LEO 抑制表面疏水性的作用强于 LIM和 TP（P ＜0．05）。结论：LEO 具有防龋应用前景。
