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三七总皂苷联合淫羊藿总黄酮改善D-gal致H9c2大鼠心肌细胞衰老的保护作用
研究三七总皂苷(total saponins of Panax notoginseng,TPNS)联合淫羊藿总黄酮(total flavonoids of epimedium,TFE)改善D-半乳糖(D-galactose,D-gal)致H9c2大鼠心肌细胞衰老的保护作用及可能机制.采用50 mol·L-1 D-gal处理H9c2大鼠心肌细胞,以不同浓度TPNS单药、TFE单药、TPNS联合TFE预处理细胞4 h,D-gal刺激H9c2心肌细胞24 h,MTT检测细胞活率进而确定协同效果佳的联合方案;β-半乳糖苷酶染色法鉴定细胞衰老程度;DCFH-DA探针检测细胞内活性氧(reactive ox-gen species,ROS)水平;线粒体膜电位法(JC-1)检测线粒体膜电位变化情况;Western blot检测沉默信息调节因子2相关酶类1(silentmating type information regulation 2 Homolog-1,SIRT1),过氧化物酶体激活物受体 γ辅激活因子1α(peroxisomal prolifera-tor-activated receptor-coactivator 1α,PGC-1α),沉默信息调节因子2相关酶类3(silentmating type information regulation 2 homolog-3,SIRT3)蛋白表达情况.研究表明TPNS(5 mg·L-1)联合TFE(5 mg·L-1)对H9c2心肌细胞增殖具有显著的协同作用(Q=1.154),因此确定其为协同作用佳的联合方案;TPNS(5 mg·L-1)联合TFE(5 mg·L-1)显著降低 β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数目和ROS荧光强度,显著提高线粒体膜电位和SIRT1,PGC-1α,SIRT3蛋白的表达量.TPNS(5 mg·L-1)联合TFE(5 mg·L-1)可产生改善D-gal致H9c2大鼠心肌细胞衰老的保护作用,机制可能与调节SIRT1/PGC-1α和SIRT3信号通路,进而调控线粒体的功能和减少氧化应激损伤有关.
