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  • 四神丸对溃疡性结肠炎模型大鼠结肠组织Toll 样受体2、4表达的影响

    作者:朱向东;王燕;何兰娟;郭婷婷;王迪

    目的:观察四神丸对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠结肠组织 Toll 样受体(TLR)-2、TLR-4基因及蛋白表达的影响,探讨其治疗脾肾阳虚型溃疡性结肠炎的作用机制。方法采用氢化可的松注射液腹腔注射+番泻叶灌胃+三硝基苯磺酸/乙醇灌肠法建立脾肾阳虚型溃疡性结肠炎大鼠模型。将90只 Wistar 大鼠随机分为空白组、模型组、阳性药组及四神丸高、中、低剂量组,各给药组给予相应药物干预。RT-qPCR 检测大鼠结肠组织 TLR-2、TLR-4 mRNA 表达,Western blot 检测大鼠结肠组织 TLR-2、TLR-4蛋白表达,并测定血清超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量。结果与空白组比较,模型组大鼠血清 SOD 活性明显降低、MDA 含量明显升高(P<0.01),结肠组织TLR-2、TLR-4基因及蛋白表达明显增强(P<0.05);与模型组比较,各给药组大鼠血清 SOD 活性明显升高、MDA 含量明显降低(P<0.05,P<0.01),结肠组织 TLR-2、TLR-4基因及蛋白表达明显降低(P<0.05, P<0.01)。结论四神丸可能通过改善结肠组织氧自由基的代谢,调控肠上皮免疫系统,达到治疗 UC的目的。

  • 缺血后处理对局灶脑缺血再灌注大鼠Toll 样受体2表达的影响

    作者:邢变枝;陈晖;汪华新

    目的:探讨缺血后处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注时 Toll 样受体2(TLR2)表达的影响。方法成年雄性 SD 大鼠90只,分为假手术组、缺血再灌注组、缺血后处理组各30只;用线栓法建立局灶性大脑中动脉闭塞模型(MCAO),随机分为假手术组(sham)、缺血再灌注组(I/R)、缺血后处理组(IPC),分别于再灌注24、48、72 h后留取大脑皮质组织;采用 Longa 的等级评分法进行神经行为学评分,免疫组化和蛋白质印记(Western blot)法检测 TLR2蛋白的表达水平,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测 TLR2 mRNA 表达水平。结果(1)缺血后处理组大鼠神经行为学评分明显改善;(2)缺血再灌注组 TLR2蛋白在再灌注24、48、72 h表达水平明显升高(P <0.05);缺血后处理组 TLR2蛋白表达在各时间点均减少(P <0.05);TLR2 mRNA 的表达趋势与蛋白表达基本一致。结论缺血后处理可以降低 TLR2表达水平,这可能是其脑保护作用的部分机制之一。

  • Pam 3CysS K4对糖尿病小鼠肾功能及肾小管上皮细胞 TLR2表达的影响

    作者:钦卓辉;李芳林;张健杰;王金林;李辉;司徒洁;邱少宏;邓立华

    【目的】探讨 Toll 样受体(Toll‐like receptors ,TLR)的特异激动剂 Pam3CysSK4对糖尿病小鼠肾功能及肾小管上皮细胞 Toll 样受体2(TLR2)表达的影响。【方法】选取 C57小鼠24只,随机分为正常组、糖尿病模型组(模型组)和干预组,每组8只,模型组采用链脲佐菌素(STZ)诱导建立小鼠糖尿病模型,干预组建立糖尿病小鼠模型后并给予股静脉注射 Pam3CysSK4,每周给予100μg ,正常组小鼠给予与其他两组等量枸橼酸缓冲液注射。三组喂养8周后,收集24 h 尿液,检测24 h 尿蛋白;称小鼠体重、肾重,计算肾重/体重;检测血清肌酐(Cr),血尿素氮(BUN)、血糖及白细胞介素‐1(IL‐1)评估肾小球硬化指数,检测肾小管上皮细胞 TLR2、核转录因子‐κB (NF‐κB)及髓样分化因子88(MyD88)、单核细胞趋化蛋白‐1(MCP‐1)表达水平。【结果】干预组和模型组血糖均高于正常组;干预组小鼠体重和24 h 尿量低于模型组,而模型组低于正常组;干预组小鼠肾重和肾重/体重高于模型组,而模型组高于正常组,其差异均有统计学意义( P <0.05)。干预组和模型组 Cr 、BUN 、IL‐1 和24尿蛋白含量、肾小球硬化指数及 TLR2、NF‐κB 、MyD88和 MCP‐1均高于正常组,而干预组高于模型组,其差异均有统计学意义( P <0.05)。【结论】高糖能够上调小鼠肾小管上皮细胞 TLR2水平,激活 TLR 信号转导通路,促进炎症因子的释放,增加对肾脏的损伤作用。

  • 腹膜透析液对腹膜间皮细胞TLR2和TLR4表达的影响

    作者:伍军;何敏;张健;何文飞;程兵

    目的:观察不同浓度葡萄糖(dextrose)腹膜透析液、艾考糊精(icodextrin)腹膜透析液对人腹膜间皮细胞 Toll 样受体2(TLR2)和 TLR4表达的影响。方法体外培养人腹膜间皮细胞株第5~10代(HMrSV5,DMEM /F12培养基含10%胎牛血清)用于实验研究。 M TT 检测细胞活力,实验分为5组:阴性对照组、1.50% dextrose 组、2.50% dextrose 组、4.25% dextrose 组、7.5% icodextrin 组,应用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测 TLR2和 TLR4的表达水平。结果不同浓度 dextrose 腹膜透析液作用24 h 对腹膜间皮细胞 TLR2和 TLR4的表达无明显影响。作用48 h ,1.50% dextrose 组、2.50% dextrose 组、4.25% dex-trose 组 TLR2分别降低(5.5±2.8)%、(31.4±7.5)%、(54.9±1.9)%,TLR4分别降低(32.9±17.6)%、(47.7±13.5)%、(66.4±13.5)%;作用72 h ,1.50% dextrose 组、2.50% dextrose 组、4.25% dextrose 组 TLR2表达分别降低(29.4±14.7)%、(38.9±9.9)%、(63.5±16.5)%,TLR4表达分别降低(59.5±16.8)%、(63.1±9.5)%、(79.2±14.0)%;7.5% icodextrin 组TLR2和 TLR4表达与阴性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 dextrose 透析液下调 HM rSV5 TLR2和 TLR4的表达;icodextrin 透析液对 TLR2和 TLR4的表达无显著影响。

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