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中哈边境阿拉山口口岸亚洲璃眼蜱首次检测到Q热立克次体核酸
目的 对新疆阿拉山口口岸地区蜱类进行Q热立克次体核酸检测.方法 采集蜱样本并进行形态学和分子生物学鉴定.聚合酶链反应扩增Q热com1基因,通过Blast软件比对分析测序产物,利用Mega 6.0软件构建分子遗传进化树.结果 共采集253只蜱,其中优势蜱种为亚洲璃眼蜱,蜱类的形态学鉴定与分子生物学鉴定结果一致.阿拉山口口岸地区蜱携带Q热立克次体核酸平均阳性率为16.21％ (41/253),亚洲璃眼蜱阳性率为22.65％ (41/181),血红扇头蜱、短垫血蜱和边缘革蜱均为阴性,亚洲璃眼蜱显著高于其他蜱种.序列分析显示与Coxiella burnetii Cb175_Guyana(HG825990,圭亚那)进化关系较近,核苷酸同源性为99％.结论 阿拉山口口岸地区亚洲璃眼蜱在16S rRNA和CO I基因序列间存在多样性,并首次在中哈边境地区亚洲璃眼蜱中检测到Q热立克次体核酸.
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新疆克拉玛依地区亚洲璃眼蜱中首次检测到伯氏疏螺旋体sensu stricto基因型
莱姆病是由伯氏疏螺旋体[Borrelia(B.)burgdorferi]引起,以硬蜱为主要传播媒介的人畜共患传染病.人群对莱姆病普遍易感,其中野外工作者、林业工人和牧民是莱姆病的高发人群.克拉玛依是我国重要的石油石化基地,基于亚洲璃眼蜱是克拉玛依主要蜱种之一,本研究对该区域亚洲璃眼蜱进行伯氏疏螺旋体核酸检测,以期对石油勘探区人群和石油工人的外出风险给出评价.
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亚洲璃眼蜱唾液腺差异表达基因GP15的克隆和分析
目的通过扩增Ha7.7,获得包含该EST的基因全长,以便研究该基因的生物学功能. 方法以Ha7.7-GSP1 和Ha7.7-GSP2和Ha7.7-GSP3 为引物,RACE法扩增亚洲璃眼蜱雌成蜱唾液腺总RNA,获得基因的5'-端.根据Ha7.7和5'-端序列设计全长引物(Ha7.7-FLP+和Ha7.7-FLP-),扩增cDNA第1链获,得全长cDNA. 结果分析表明,基因大小为449 bp,由吸血诱导亚洲璃眼蜱成蜱唾液腺表达. 结论与数据库资料比对显示,GP15为新纪录(Genbank登录号DQ020265).
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中国和哈萨克斯坦边境阿拉山口口岸蜱中首次检测到巴贝斯虫核酸
目的 对中国和哈萨克斯坦(中哈)边境阿拉山口口岸地区蜱虫进行巴贝斯虫核酸检测.方法 采用白布旗法和动物体表法在阿拉山口口岸艾比湖湿地采集蜱虫样本.应用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增巴贝斯虫18s rRNA基因,BLAST分析测序产物,利用Mega 6.0构建分子遗传进化树.结果 阿拉山口口岸蜱中巴贝斯虫核酸检测阳性率为12.65％ (32/253).经测序,32条巴贝斯虫序列分为ALSK174、ALSK191、ALSK019三组.Blast分析显示:ALSK174与驽巴贝斯虫(EU888904,南非)同源性高,为99.72％(356/357);ALSK 191与隐藏巴贝斯虫(KP745626,土耳其)同源性高,为99.72％ (350/351);ALSK019与奥氏巴贝斯虫(KC460321,加拿大)具有95.76％(339/354)同源性.结论 首次在中哈边境地区蜱中检测到巴贝斯虫核酸.
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新疆北疆亚洲璃眼蜱贝纳柯克斯体的检测
目的 检测新疆北疆亚洲璃眼蜱贝纳柯克斯体感染情况,为减少人和家畜Q热病的发生提供依据.方法 2016年4-7月,利用布旗法和动物体表检查法采集北疆福海县、阿拉山口市、石河子市、呼图壁县和克拉玛依市5个县(市)蜱类样本,形态学鉴定蜱种后提取优势蜱的全基因组DNA,采用PCR方法进行蜱种分子学鉴定以及病原体的检测,阳性产物进行16S rRNA测序与BLAST分析,利用Mega 6.0软件构建分子遗传进化树.结果 新疆北疆5个县(市)共采集蜱822只,其中优势蜱为亚洲璃眼蜱,共采集580只,经16S rRNA测序分析表明,序列均为亚洲璃眼蜱指名亚种,与新疆尉犁县的亚洲璃眼蜱(KF527439)有较高的同源性.应用PCR方法扩增亚洲璃眼蜱贝纳柯克斯体的特异性DNA片段,总阳性率为19.48%(113/580).BLAST分析表明,扩增的阳性序列与贝纳柯克斯体的同源性高,达99.66%(296/297);分子遗传进化树显示,贝纳柯克斯体核酸序列种类较多,具有遗传多样性.结论 新疆北疆5个县(市)亚洲璃眼蜱中均存在贝纳柯克斯体感染,提示新疆各县(市)应加强人和家畜Q热的监测.
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从中哈边境亚洲璃眼蜱中检测到弗朗西斯氏菌样内共生体核酸
目的 对中哈边境铁路线区域的亚洲璃眼蜱中弗朗西斯菌属及内共生体检测.方法 2015年在中哈边境采集的游离蜱进行形态学与分子学鉴定后,扩增弗朗西斯菌属及共生体16S rRNA和sdhA基因,对阳性产物测序后进行Blast分析,用Mega 6.0构建分子遗传进化树.结果 对243只游离蜱经形态学与分子学鉴定为亚洲璃眼蜱后,经PCR病原学检测及测序得到35份(只)阳性,阳性率为14.4％.分析得到两株(Seql和Seq2)不同基因型的序列,遗传进化树显示,这两株弗朗西斯菌属内共生体聚到1支,未检测到土拉弗朗西斯菌.结论 在中哈边境铁路线区域亚洲璃眼蜱中首次检测到弗朗西斯菌样核酸.
