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亚洲璃眼蜱唾液腺差异表达基因GP15的克隆和分析
目的通过扩增Ha7.7,获得包含该EST的基因全长,以便研究该基因的生物学功能. 方法以Ha7.7-GSP1 和Ha7.7-GSP2和Ha7.7-GSP3 为引物,RACE法扩增亚洲璃眼蜱雌成蜱唾液腺总RNA,获得基因的5'-端.根据Ha7.7和5'-端序列设计全长引物(Ha7.7-FLP+和Ha7.7-FLP-),扩增cDNA第1链获,得全长cDNA. 结果分析表明,基因大小为449 bp,由吸血诱导亚洲璃眼蜱成蜱唾液腺表达. 结论与数据库资料比对显示,GP15为新纪录(Genbank登录号DQ020265).
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利用5'-RACE技术进行人肝再生增强因子相互作用肽cDNA5'末端快速扩增及序列分析
目的:利用5'-RACE技术进行人肝再生增强因子(hALR)相互作用肽cDNA5'末端快速扩增并进行序列分析.方法:按照5'-RACE试剂盒(Takara)操作流程进行hALR相互作用肽cDNA5'末端快速扩增,用BLAST技术对扩增序列进行生物信息学分析.结果:成功获取487bp的5'-RACE反应产物,其中5'端延伸了275bp,同源序列分析表明与人Citron激酶mRNA高度同源.结论:5'-RACE技术可以用于快速有效扩增已知部分cDNA序列的5'末端,Citron激酶可能是与hALR具有相互作用的蛋白.