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荧光探针熔解曲线方法文献资料
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高通量荧光PCR组合方法鉴定16种金黄色葡萄球菌肠毒素的方法建立及评估
目的 建立一种高效、特异的荧光探针熔解曲线方法,用于鉴定16种金黄色葡萄球菌肠毒素.方法 根据金黄色葡萄球菌肠毒素SEA ～ SEQ特异基因序列设计不同杂交连接探针,建立金黄色葡萄球菌肠毒素检测体系,评估其低检出限、特异度、可重复性等指标.与普通PCR方法比较,采用荧光探针熔解曲线方法对本实验室的158株食物中毒金黄色葡萄球菌进行检测,评估新方法的灵敏度和特异度.结果 荧光探针熔解曲线方法低检出限为0.80 ～ 2.15 ng/μl,特异度为100.0％,无交叉荧光信号产生,变异系数＜1％.与普通PCR方法比较,新方法的灵敏度为95.4％,特异度为100.0％,Kappa值为0.88.结论 荧光探针熔解曲线技术检测金黄色葡萄球菌肠毒素的方法可覆盖金黄色葡萄球菌16种肠毒素,具有快速、准确、特异性高的特点.
关键词： 金黄色葡萄球菌肠毒素 荧光PCR 荧光探针熔解曲线方法
