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两种出血热抗体检测方法实用性的评价
近几年来,我市出血热病例时有发生,并有逐年上升的趋势.选择实用的检测方法,对于出血热的诊断、治疗、预防、控制疫情十分重要,目前公认的常规检验方法有:间接免疫荧光试验(IFAT),抗μ链IgM捕获ELISA法,间接酶免疫吸附试验(ELISA),血凝抑制试验(HI)空斑减少中和试验(PRNT)等.
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空斑减少中和试验测定血清抗乙脑病毒抗体
目的对比空斑减少中和试验与反向被动血凝抑制试验在评价人血清抗乙脑病毒抗体时测定结果的异同.方法对450名6~10岁儿童接种灭活乙脑疫苗前后的血清样本用两种方法进行了测定.结果两种方法在测定免前人血清抗乙脑病毒抗体时存在显著性差异,在测定免后人血清抗乙脑病毒抗体时两者没有差异.结论空斑减少中和试验比反向被动血凝抑制试验在测定人血清抗乙脑病毒抗体时灵敏.
关键词: 空斑减少中和试验 反向被动血凝抑制试验 抗乙脑病毒抗体 -
逆转录-聚合酶链反应用于肾综合征出血热病毒基因分型诊断
目前,用于肾综合征出血热病毒(HFRSV)分型的方法主要是空斑减少中和试验(PRNT).由于操作过于复杂与繁琐,仅用于实验研究.逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)是以RNA为模板,联合RT与PCR,具有快速、简便、灵敏、特异等优点.近年来,国内外已有学者将其应用于HFRSV的分型研究并取得了良好的效果[1].
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巴泰病毒云南株生物学性状研究
目的 掌握巴泰(Batai)病毒生物学特性,为巴泰病毒的监测和调查研究提供科学依据.方法 用分离自云南省菲律宾按蚊(Anopheles philippinensis)的巴泰病毒LC92-4株,采用细胞培养、小白鼠感染、血凝抑制、间接免疫荧光、空斑试验以及病理检测和电镜观察等方法进行生物学特性试验.结果 巴泰病毒可引起<4周龄小白鼠发病死亡.感染鼠脑病毒颅内、皮下和腹腔接种2周龄小白鼠的LD50分别为5.67logLD50/0.025 mL、5.3logLD50/0.03 mL和4.5logLD50/0.03 mL.感染病毒鼠的心、肝、脾、肺、肾病毒悬液颅内接种2周龄小白鼠,LD50分别为3.75、4.25、2.25、3.0、2.25 logLD50/0.025 mL.感染发病小白鼠脑、心、肝、脾、肺、肾均发现病理改变.感染鼠的脑组织经电镜检测发现圆形有包膜病毒颗粒,大小约82 nm.巴泰病毒能在BHK21和Vero细胞产生明显病变,并可产生空斑;在BHK21细胞上,空斑滴度为6.04logPFU/mL;在C6/36细胞上不产生病变.感染病毒鼠脑接种BHK21和Vero细胞,TCID50分别为 5.50logTCID50/0.025 mL和5.00 logTCID50/0.025 mL.在pH5.75~7.0条件下,巴泰病毒不具有与鸽、鹅、鸡、鸭、人O型和绵羊红血球发生凝集的特性;空斑减少中和试验检测云南省357份人血清,阳性2份,中和抗体滴度均为1∶10.结论 乳小白鼠和幼年小白鼠对巴泰病毒高度易感.BHK21和Vero细胞对巴泰病毒敏感,可用于病毒分离培养和空斑测定.建立的免疫荧光和空斑减少中和试验具有特异性,可用于巴泰病毒抗体检测.应进一步开展该病毒的分布及其与疾病关系的研究.
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非典型肺炎灭活疫苗免疫动物效果评价
目的应用空斑减少中和试验对非典型肺炎灭活疫苗动物免疫血清进行中和抗体测定,以评价其免疫效果.方法用Vero-E6细胞接种6孔塑料细胞培养板,加两层含琼脂糖培养基,以中性红为染色剂建立空斑试验,以能减少50%的空斑为标准测定抗SARS中和抗体.结果三批非典型肺炎灭活疫苗免疫小鼠和家兔均产生较高的中和抗体.结论非典型肺炎灭活疫苗对两种动物具有良好的免疫效果.
关键词: 传染性非典型肺炎/免疫学 传染性非典型肺炎疫苗 灭活 空斑减少中和试验 小鼠 兔 -
烟台市肾综合征出血热病人血清学分型
[目的]了解烟台市肾综合征出血热(HFRS)病人的血清型别,为防治决策提供依据.[方法]2000年采用空斑减少中和试验对临床诊断为HFRS 的45例病人恢复期血清进行分型.[结果]45例病人临床分型轻、中、重型分别为23例、20例和2例.血清分型结果,40例为Ⅱ型,3例为Ⅰ型,2例Ⅰ、Ⅱ型中和抗体滴度相等.[结论]烟台市HFRS疫区同时存在两型汉坦病毒流行,但血清学分型以Ⅱ型为主.
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应用BHK21细胞检测汉坦病毒中和抗体方法的建立
本文报道应用汉坦病毒(HV)Ⅰ型76-118、Chen、J3、J5、J12,和Ⅱ型UR、R22、L99等8株病毒在BHK21细胞上培养和观察,发现病毒感染BHK21细胞后可规律出现病变,且可测出病毒滴度.分别应用BHK21细胞与Vero-E6细胞同时做空斑减少中和试验(PRNT)检测同批血清的抗体中和效价,结果一致,且稳定性特异性好,因此BHK21细胞可作为研究HV的另一个敏感实验细胞系,对研究HV的某些生物学特性及实验方法均有实用价值.