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丹龙醒脑方对脑缺血再灌注损伤大鼠SVZ区Frizzled3、Dsh1及β-catenin表达的影响与促进神经干细胞增殖的机制
目的:探讨丹龙醒脑方对局灶性脑缺血再灌注大鼠侧脑室室管膜下区(Svz)神经干细胞(NSCs)增殖与Frizzled3、Dshl、β-catenin表达的关系.方法:将120只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、依达组、丹龙组.后3组用线栓法制备局灶性脑缺血再灌注(MCAO/R)模型,再灌注7d后取缺血侧SVZ脑组织.采用Brdu免疫荧光法检测SVZ区NSCs增殖,RT-qPCR法、Western Blot法分别检测Frizzled3、Dsh1、β-catenin mRNA和蛋白的表达.结果:与假手术组比较,其余各组Brdu阳性细胞数明显增多,Frizzled3、Dshl、β-catenin蛋白及mRNA的表达明显升高(P＜0.05,P＜0.01);与模型组比较,依达组、丹龙组Brdu阳性细胞数明显增多,Dshl、β-catenin mRNA及蛋白的表达明显增强(P＜0.05,P＜0.01),丹龙组Frizzled3表达明显增强(P＜0.05,P＜0.01),但依达组不明显.依达组、丹龙组组间比较,除Frizzled3蛋白表达丹龙组要优于依达组(P＜0.01),其余指标均无明显差异.结论:丹龙醒脑方能促进脑缺血后SVZ区NSCs增殖,其机制可能与通过上调Frizzled3和Dsh1的水平,进而促进Wnt信号的传递和增强关键因子β-eatenin的表达有关.
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丹龙醒脑方对脑缺血再灌注大鼠侧脑室室管膜下区神经干细胞增殖与c-myc、c-jun表达的影响
目的：探讨丹龙醒脑方对局灶性脑缺血再灌注大鼠侧脑室室管膜下区（SVZ）神经干细胞（NSCs）增殖与c-myc、c-jun表达的关系。方法采用线栓法制备大脑中动脉栓塞局灶性脑缺血再灌注模型。150只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和丹龙醒脑方小、中、大剂量组。于再灌注24 h后，丹龙醒脑方各剂量组予相应剂量药液灌胃，模型组和假手术组予等体积蒸馏水灌胃。1次/d，连续7 d。再灌注1、3、7 d采用m-NSS法进行神经功能缺损评分，再灌注7 d取缺血侧SVZ脑组织，采用Brdu免疫组化检测NSCs增殖， RT-qPCR、Western blot分别检测c-jun、c-myc mRNA和蛋白的表达。结果与假手术组比较，其余各组神经功能缺损评分明显升高（P＜0.01）；再灌注3、7 d，与模型组比较，丹龙醒脑方各剂量组神经功能缺损评分明显降低（P＜0.01）。与假手术组比较，其余各组Brdu阳性细胞率明显升高；与模型组比较，丹龙醒脑方各剂量组Brdu阳性细胞率亦明显升高（P＜0.01）。丹龙醒脑方各剂量组较假手术组、模型组c-jun、c-myc蛋白及mRNA表达均明显增强（P＜0.05，P＜0.01）。结论丹龙醒脑方能改善脑缺血后神经功能，促进SVZ NSCs增殖，其机制可能与增强c-jun和c-myc表达及延长表达持续时间有关。
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电针对高血脂合并脑缺血大鼠侧脑室室管膜下区星形胶质细胞活化的影响
目的 观察电针对高血脂合并脑缺血大鼠前脑侧脑室室管膜下区星形胶质细胞活化的影响.方法 采用SD成年雄性大鼠49只,随机分为正常组,模型组、假手术组、电针1组和电针2组.除正常组,其余各组大鼠高脂饲料喂养42 d,电针1组电针丰隆,每天1次,治疗7 d.第50天,模型组和电针组大鼠采用50％FeCl3诱导建立高血脂合并脑血栓模型,术后电针组电针丰隆和百会,每天1次,持续14 d.用神经功能评分方法评定行为学变化,用生物化学法检测血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)水平,采用HE染色观察形态学改变,免疫组化方法检测损伤侧前脑侧脑室室管膜下区胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达.结果 模型组大鼠高血脂合并脑缺血术后TC、TG、LDL升高,HDL降低,差异具有统计学意义(P<0.05),电针组TC、LDL水平降低(P<0.05).模型组大鼠神经功能评分增高,HE染色可见皱缩神经元,整体组织形态结构显脑缺血症,侧脑室室管膜下区GFAP面密度明显升高(P<0.01),电针治疗可改善神经功能评分,缺血侧细胞核逐渐恢复正常,治疗后面密度持续增加至术后14 d,术后7 d显著,电针1组高于电针2组(P<0.05).结论 高血脂阶段电针丰隆,脑缺血后电针丰隆、百会可通过调节血脂代谢,促进星形胶质细胞活化以及受损神经系统修复.
