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基于SELDI-TOF-MS技术的慢性肾衰竭4种舌苔相关蛋白研究
目的:采用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)技术研究慢性肾衰(CRF)患者4种类型舌苔中的差异蛋白标志物.方法:采集CRF患者的舌苔102例,其中腻苔组56例(白腻苔组24例、黄腻苔组32例)、非腻苔组46例,正常对照组的薄白苔38例,采用NP20蛋白芯片技术进行舌苔蛋白质组学研究,用蛋白芯片阅读器PBSⅡ对芯片进行扫描、分析.结果:在质荷比1 000-20 000范围内,腻苔组与正常对照组有17个差异蛋白峰(P＜0.01),非腻苔组与正常对照组有19个差异蛋白峰(P＜0.01),腻苔组与非腻苔组有9个差异蛋白峰(P＜0.01),白腻苔组与正常对照组有9个差异蛋白峰(P＜0.01),黄腻苔组与正常对照组有11个差异蛋白峰(P＜0.01).结论:初步筛选出了CRF 4种类型的舌苔蛋白标志物,为CRF中医舌诊的客观化研究提供了一定的实验依据.
关键词： 慢性肾衰竭 舌苔 蛋白 表面增强激光解析离子化飞行时间质谱技术 -
大鼠胰腺上皮内瘤变和胰腺癌模型血清蛋白质谱的差异表达
目的:利用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF MS)技术,分析由7,12-二甲基苯并蒽(DMBA)诱导建立的大鼠胰腺上皮内瘤变(PanIN)和胰腺癌(PC)模型血清蛋白质谱的差异表达.方法:40只♂清洁级SD大鼠为模型组,DMBA胰腺局部种植建立PanIN和PC模型,根据PanIN标准进行病理学分级.26只♂清洁级SD大鼠为正常对照组.采用SELDI-TOF MS和铜离子鳌合芯片(IMAC-Cu2+芯片)检测大鼠血清蛋白质谱, Biomarker Wizard 3.0软件分析比较对照组、PanIN组和PC组之间的差异表达蛋白.结果:DMBA胰腺局部种植后共获得PC 11例,PanIN 18例.与对照组比较, PanIN组和PC组表达强度显著上调(P<0.001)的蛋白质峰有19个,显著下调(P<0.001)的蛋白质峰有11个;其中质荷比分别为5835.2、4087.3、4786.5、4800.5、3932.2、5765.9、5924.8、5001.9、3913.7的9个蛋白质峰表达强度在对照组、PanIN组和PC组呈逐级递增趋势, 质荷比分别为1096.9、1478.9、8572.9、1007.1的4个蛋白质峰表达强度呈逐级递减趋势.结论:与正常大鼠比较,PanIN和PC模型大鼠血清蛋白质谱表达发生显著变化,这些差异表达蛋白质在胰腺癌中的作用值得进一步深入研究.
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结肠癌与大肠腺瘤及癌旁正常肠黏膜组织差异表达蛋白的筛选
目的:探讨结肠癌、大肠腺瘤及正常肠黏膜组织中蛋白质组的表达差异及其意义.方法:应用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测结肠癌、大肠腺瘤及正常肠黏膜组织的蛋白图谱,通过Biomarker Wizard软件分析发现差异蛋白,用蛋白质组学数据库检索出部分差异蛋白.结果:发现16种差异蛋白,其中大肠癌组织质荷比(M/Z)为4 904、7 602、7 705、14 990和15 708的蛋白峰强度显著高于正常组织和大肠腺瘤患者,P＜0.01；大肠腺瘤与正常人相比,除在M/Z为4904的蛋白峰强度差异有统计学意义外(P=0.006),其余差异均无统计学意义,P＞0.05;数据库检索结果提示,这些蛋白分别为CEA、p53R2、HCG2020031、Kallikreiw11 (hk11)和CD99,其中,CEA为目前临床上常用的肿瘤标志,另外4种差异蛋白质可能具有成为肿瘤新标志潜能.结论:SELDI-TOF-MS技术能很好的显示结肠癌、大肠腺瘤与正常肠黏膜组织间的差异表达蛋白,本研究筛选出的其他4种新差异表达蛋白质有可能为研究结肠癌癌变过程中的生物学行为提供新的分子标志.
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表面增强激光解析离子化飞行时间质谱技术筛选的肺腺癌血清标志蛋白与传统肿瘤标志物的比较
目的 比较表面增强激光解析离子化飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)筛选的肺腺癌血清标志蛋白与传统肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、糖类抗原(CAl25)和细胞角蛋白19片断(CYFRA21-1)对肺腺癌诊断价值的差异.方法 肺腺癌组和健康对照组各71例,按性别、年龄配对,采用SELDI-TOF-MS检测血清蛋白质质谱,筛选出血清肺腺癌标志蛋白.采用化学发光法检测血清CYFRA21-1、CEA、CA125和NSE水平.并比较联合检测对肺腺癌的诊断价值.结果 ①SELDI-TOF-MS检测结果:肺腺癌组有5个蛋白质峰明显呈高表达,该5个峰的相对分子质量分别为4 047.79±1.60、4 203.99±1.91、4 959.81±2.13、5 329.30±2.55和7 760.12±4.11.②肺腺癌组血清CEA、CA125、NSE和CYFRA21-1水平分别为(54.38±12.79)μg/L、(130.45c±54.36)mg/L、(16.85±4.65)μg/L和(23.45±5.75)μg/L,均显著高于健康对照组[(5.26±1.74)μg/L、(21.01±8.16)mg/L、(8.53±3.08)μg/L和(2.48±1.23)μg/L,P值均<0.05].③5个蛋白质峰联合检测中,以3项指标阳性对肺腺癌的诊断效率高(灵敏性、特异性分别为92.96%、90.14%);CEA、CA125、NSE和CYFRA21-1联合检测中,2项指标阳性对肺腺癌的诊断效率较高(灵敏性、特异性分别为63.38%、56.34%).结论 SELDI-TOF-MS技术是一种快速、简便易行且高通量的分析方法,可直接筛选出相对特异的肿瘤标志蛋白,与传统肿瘤标志物相比,更利于肺腺癌早期诊断和筛查.
关键词： 肿瘤标志物 肺腺癌 表面增强激光解析离子化飞行时间质谱技术 蛋白质组学 -
SELDI-TOF-MS技术检测肺腺癌血清生物标志物
[目的]用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术寻找肺腺癌病人血清蛋白标志物,探讨吸烟与肺腺癌血清中蛋白质组谱变化的关系.[方法]收集肺腺癌病人和正常对照人群血清各50例,按照年龄、性别、吸烟史进行一一配对,采用WCX2芯片技术对血清蛋白进行捕获,用蛋白芯片阅读器PBSⅡ对芯片进行扫描、分析.[结果]肺腺癌病人血清蛋白图谱与正常对照组相比,存在10个差异表达蛋白(P＜10-5),其中包括6个高表达蛋白,分子量分别是4050Da、4205Da、5329Da、5899Da、7761Da、9285Da,4个低表达蛋白,分子量分别是2564Da、2932Da、3082Da、3442Da.肺腺癌病人有吸烟史的与不吸烟的进行比较,血清蛋白表达差异无显著性(P＞0.01).[结论]SELDI-TOF-MS技术能筛选出灵敏度和特异性较好的差异蛋白,为肺腺癌的早期发现提供了一种新的、无创实验方法.
关键词： 表面增强激光解析离子化飞行时间质谱技术 肺腺癌 蛋白质组学 -
表面增强激光解析离子化飞行时间质谱技术筛查早期肺腺癌的临床价值
目的 探讨表面增强激光解析离子化飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)筛查结节状磨玻璃影的早期肺腺癌的临床应用价值.方法 所有患者进行CT检查显示:病灶直径≤2 cm,结节状磨玻璃影,且实性成分大于30％.对CT检查上述异常的患者,术前采用SELDI-TOF-MS进行血清蛋白指纹图谱检测,显示某一肺癌相关的蛋白峰增高,即考虑为早期肺腺癌.分别将SELDI-TOF-MS、CT检查检查结果与术后病理诊断结果进行对比,计算诊断的正确率、灵敏度和特异度.结果 CT检测的诊断正确率为72.29％ (60/83),灵敏度为72.97％ (54/74),特异度为66.7％(6/9);SELDI-TOF-MS检测的诊断正确率为97.50％ (78/80),灵敏度为97.3％ (72/74),特异度为100％ (6/6).两者比较差异均具有统计学意义(P＜0.01).结论 血清蛋白指纹图谱技术筛查结节状磨玻璃影的早期肺腺癌具有较高的灵敏度和特异度,可提高早期肺癌的正确率.
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蛋白飞行质谱在恶性胸腔积液诊断的初步研究
目的 用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术探寻恶性胸水蛋白标志物,建立快速、简便的恶性胸腔积液诊断方法系.方法 收集恶性和非恶性胸水各50例,按照年龄、性别进行一一配对,采用WCX2磁珠技术对血清蛋白进行捕获,用蛋白质谱阅读器PBSⅡ对芯片进行扫描、分析.结果 恶性和非恶性的胸水蛋白图谱相比,存在5个差异表达蛋白(P＜0.05),其中包括3个高表达蛋白,分子量分别是5 335、7 577、11 670 Da.结论 SELDI-TOF-MS技术能筛选出灵敏度和特异性较好的差异蛋白,为恶性胸腔积液的早期诊断提供了一种新的实验方法.
关键词： 表面增强激光解析离子化飞行时间质谱技术 胸腔积液 蛋白质组学
