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美迪紫檀素的体外细胞毒性研究
目的:探究美迪紫檀素对正常大鼠心肌细胞 H9C2、人胚肝细胞 L-02、人胚肾上皮细胞 HEK293、大鼠主动脉血管平滑肌细胞 VSMC的细胞毒性作用。方法体外培养 H9C2、L-02、HEK293、VSMC细胞,加入不同浓度(0.1、1、5、10、50、100、200、250、300μmol/L)的美迪紫檀素溶液,采用 MTT法检测美迪紫檀素对细胞增殖的影响;同时给予1、50、300μmol/L的美迪紫檀素溶液,利用 Hoechst33342荧光染色观察细胞凋亡情况,并考察细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)及肌酸激酶(CK)活性的变化。结果与对照组比较,0.1~300μmol/L浓度下的美迪紫檀素对 H9C2细胞增殖和凋亡没有影响,培养液中的 LDH、AST、ALT活性无统计学差异(P >0.05)。0.1~300μmol/L浓度下的美迪紫檀素均可抑制 L-02和 VSMC细胞增殖,促进细胞的凋亡,并可使培养上清液中的 LDH活力增加,L-02细胞培养上清液中 AST和 ALT活力也增加(P <0.05),在250~300μmol/L范围内对 HEK293细胞有一定的抑制作用,促进其凋亡,并增加 LDH活力。美迪紫檀素对 L-02和 HEK293细胞的抑制作用呈浓度依赖性。结论美迪紫檀素对 H9C2细胞生长没有影响,对 L-02、VSMC 细胞生长有一定的影响,250~300μmol/L浓度的美迪紫檀素对 HEK293细胞生长有影响。
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内质网应激抑制剂在阿霉素诱导H9C2心肌细胞毒性中的保护作用
目的 探讨内质网应激在化疗药物诱导的心肌细胞损伤中的作用,为临床对抗化疗引起的心肌损伤提供一定的思路.方法体外培养大鼠心肌细胞H9C2,给予不同浓度的阿霉素或者联合内质网应激抑制剂4-苯丁酸,利用MTT检测各组细胞存活率;流式细胞术检测凋亡率;Western blotting检测凋亡相关蛋白的表达.结果不同浓度的阿霉素可以明显的降低细胞的存活率,增加细胞凋亡率和凋亡蛋白的表达,预先给予内质网应激抑制剂可以明显的降低阿霉素引起的细胞存活率的下降和凋亡的发生.结论内质网应激抑制剂对阿霉素引起的细胞损伤具有明显的保护作用.
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氯喹对心肌细胞H9C2缺氧复氧损伤的保护作用
目的 探讨氯喹对缺氧复氧引起的心肌细胞损伤的保护作用,为临床治疗心肌缺血提供一定的理论依据.方法 体外培养大鼠心肌细胞H9C2,通过更换培养和利用氮气构建H9C2细胞缺氧复氧模型,利用氯喹进行预处理细胞,MTT检测各组细胞存活率;流式细胞术检测凋亡率;Western blotting检测凋亡相关蛋白的表达.结果 缺氧复氧可以明显的降低细胞的存活率,增加细胞凋亡率和凋亡蛋白的表达,给予氯喹可以明显的缓解缺氧复氧引起的细胞存活率的下降和凋亡的发生.结论 氯喹对缺氧复氧引起的细胞细胞损伤具有明显的保护作用.