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中药土贝母诱导人乳腺癌细胞凋亡的实时成像
目的:采用先进的荧光实时显像技术对中药土贝母植物块茎提取物抗乳腺癌作用进行评价.方法:MDA-MB-231人乳腺癌细胞被设计成为细胞质红色荧光蛋白(RFP)基因表达而细胞核组蛋白H2B绿色荧光蛋白(GFP)基因表达的双色荧光细胞,并分别在2D平面塑料平皿及3D立体明胶海绵块两种不同的培养环境中培养,经土贝母鲜品二氯甲烷提取物( DEFT)干预后,荧光共聚焦显微镜下观察细胞形态及核碎片形成的情况;DNA电泳方法进一步检测细胞凋亡.结果:土贝母鲜品二氯甲烷提取物作用24h后荧光显微镜下即观察到MDA-MB-231细胞出现凋亡的形态学改变;DNA电泳在药物干预48h后检测到凋亡的DNA碎片梯带,72h后更加明显;3D明胶海绵培养的MDA-MB-231细胞经实验药物作用后其形态学改变的效果不如2D环境下明显.结论:土贝母鲜品二氯甲烷提取成分具有抗乳腺癌治疗的潜能.
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四种检测细胞凋亡方法的比较
目的评价四种检测细胞凋亡的方法. 方法以蟾蜍素(bufalin)诱导的白血病细胞株HL60细胞凋亡,选择流式细胞术(FCM)、原位缺口末端标记法(TUNEL)、DNA电泳和电镜(EM)技术对比检测细胞凋亡. 结果定性的EM和DNA电泳技术可靠,而TUNEL和FCM主要用于定量检测 . 结论 EM、TUNEL和FCM检测细胞凋亡率具有显著相关性.
关键词： 细胞凋亡 流式细胞术 原位 缺口末端标记法 DNA电泳 电镜技术 -
老年大鼠脑细胞凋亡的实验研究
为研究老年大鼠脑细胞凋亡,采用提取大鼠脑细胞进行DNA电泳的方法,结果显示老年大鼠脑细胞DNA电泳出现细胞凋亡的特征性梯状电泳条带,说明老年大鼠脑细胞的凋亡率增高是衰老的特征之一,可利用这一方法研究中医药抗衰老的药物和机制.
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肝素对人髓系白血病K562细胞增殖及凋亡的影响
目的:探讨肝素对长春新碱诱导的人髓系白血病K562细胞增殖及凋亡的影响.方法:肝素(5、25、50、100、200 U/mL)处理K562细胞1 h后,加入长春新碱(O.05 μg/mL)24 h,应用Trypan blue拒染法和MTT法检测不同浓度肝素对K562细胞增殖的影响,DNA琼脂糖凝胶电泳检测肝素对长春新碱诱导的K562细胞凋亡的影响.结果:肝素各组的细胞数量与对照组之间差异均无统计学意义(P均＞O.05),肝素各组的OD值与对照组之间差异均无统计学意义(P均＞O.05);肝素在5～200 U/mL的浓度时能够抑制长春新碱诱导的K562细胞凋亡及DNA凋亡梯带的形成.结论:不同浓度肝素对K562细胞无毒,无刺激或抑制作用,但可抑制由长春新碱诱导的K562细胞凋亡.
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2008年温州市肠道病毒EV71型感染的检测与分析
目的:监测2008年温州市EV71感染情况,建立温州市手足口病EV 71型检测系统,预防和控制温州市EV71的大规模流行.方法:将样本中病毒进行核酸提取,通过荧光定量PCR、RT-PCR扩增及其电泳,分别检测肠道病毒通用型和EV71型、Cox A16;对EV 71型病毒进行VP1测序和亚型分析.结果:检测284份标本的核酸样品,有179份样品为肠道通用病毒阳性,85份样品EV71阳性,4份样品CoxA16阳性.结论:温州市EV71感染主要集中在沿海区域,春夏季高发,易感人群为5岁以下儿童,主要流行的基因型为C4亚型.
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不同浓度三氧化二砷对人胃癌MGC-803细胞的作用
用不同浓度的三氧化二砷(As2O3)作用于培养的胃癌MGC-803细胞,噻唑蓝(MTT)细胞活力测定显示As2O3能明显抑制MGC-803细胞生长,进一步用Hoechst33342和碘化丙啶(PI)双荧光流式细胞仪(FCM)检测和琼脂糖DNA电泳,表现明显凋亡特征,证明As2O3抑制MGC-803细胞生长是通过诱导其凋亡实现的.细胞生长抑制与细胞凋亡率相一致,具有时-效和量-效关系.
