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MyD88依赖途径在膝骨关节炎进程中的基因表达相关性研究
目的:探讨MyD88依赖途径的相关基因TLR4、NF-κB与MyD88在膝骨关节炎(osteoarthritis,OA)不同病程下大鼠滑膜组织的表达特点及相关性.方法:将60只Wistar大鼠随机分为6组:空白组(N)、假手术组(F)和模型组[2周组(2W)、4周组(4W)、8周组(8W)、12周组(12W)],每组各10只.各模型组以Hulth法建立大鼠膝OA动物模型,空白组不予手术,假手术组仅打开关节腔.按上述设计时间收集样本,经总RNA的提取及反转录后,用Realtime PCR法对各组滑膜组织中TLR4、NF-κB及MyD88的相对表达量进行检测,分析其相关性.结果:假手术组各基因的mRNA表达与空白组相比差异均无统计学意义((P＞0.05);而各模型组较空白组各基因表达增强(P＜0.05).相关性分析显示:MyD88与TLR4及NF-κB的mRNA相关性系数分别为0.91和0.86,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:MyD88与TLR4、NF-κB的表达均呈显著的正相关性,在通路上起重要的枢纽作用,可通过其表达预测通路上其他基因的表达情况,进一步明确膝OA病理机制.
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MyD88依赖途径介导云芝糖肽对荷瘤小鼠免疫调节的机制研究
目的：通过探讨云芝糖肽（ PSP）在荷瘤小鼠体内的免疫调节及信号转导机制，研究PSP对荷瘤小鼠MyD88信号转导通路的调控作用，验证MyD88依赖途径是PSP免疫调节抗肿瘤的重要信号通路。方法：用C57BL／6小鼠建立艾氏腹水癌（ EAC）实体型荷瘤小鼠模型，分为2组：野生型（ WT）组与基因缺陷型（ MyD88－／－）组，连续灌胃给药PSP 22天，实时荧光定量PCR（ Q－PCR）检测MyD88依赖途径与非依赖途径通路相关基因在小鼠脾脏中的表达；免疫印迹法（ Western blot）检测通路中相关蛋白的表达；ELISA检测小鼠眼球血中终端效应因子变化。结果：野生型（ WT）组与基因缺陷型（ MyD88－／－）组小鼠脾脏TLR4信号通路相关基因及蛋白表达均明显升高，MyD88－／－组小鼠脾脏中MyD88依赖途径的承接因子MyD88为零；与WT组相比，MyD88非依赖途径通路中TRAM，TRIF的基因及蛋白表达量均无明显变化（P＞0．05），共同途径中TRAF6、NF－κB、AP－1的基因及蛋白表达量均明显降低（P＜0．05）；MyD88－／－组眼球血中终端效应因子TNF－α、IFN－γ、IL－2、IL－6及IL－10的分泌量较WT组明显降低（P＜0．05）。结论：云芝糖肽对荷瘤小鼠的免疫调节作用可能是通过MyD88依赖途径信号通路来实现的。
