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软坚消瘿颗粒长期毒性实验对大鼠血液学及血液生化学的研究
目的：研究软坚消瘿颗粒对大鼠血液及血液生化的影响，探讨软坚消瘿颗粒长期毒性反应，为临床研究提供依据。方法雌雄SD大鼠各120只，按体质量、性别随机分为正常对照组，软坚消瘿颗粒低剂量组、中剂量组、高剂量组，每组60只。正常对照组给予同体积的生理盐水灌胃。软坚消瘿低、中、高剂量组分别给予软坚消瘿颗粒8 g生药/（ kg·d）、20 g生药/（ kg·d）、60 g生药/（ kg ·d）灌胃。2次/d，每周给药6 d，周日停药。实验周期为26周，其中，给药周期为24周，恢复期2周。给药3个月，给药6个月，停药恢复半个月后，各组随机选取数量约1/3大鼠麻醉后，腹主动脉采血，供血液学及血液生化学检测。结果软坚消瘿颗粒对大鼠长期毒性血液学及血液生化学检验结果显示，低、中、高3个给药组大鼠中期、末期以及恢复期血液学检测值与正常对照组比较，有部分结果显示有统计学意义，但是从专业角度分析，认为没有毒理学意义。结论软坚消瘿颗粒按实验的剂量服用安全，对大鼠无明显的毒副作用。
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软坚消瘿颗粒长期毒性试验对大鼠脏器系数及组织病理学影响的研究
目的：探讨软坚消瘿颗粒制剂对大鼠的长期毒性反应，并通过大鼠体重、脏器系数、组织病理学的结果，为临床研究提供依据。方法将 SD 大鼠120只，随机分为对照组，软坚消瘿颗粒低、中、高剂量组，各60只。对照组灌胃给予同体积的生理盐水。软坚消瘿低、中、高剂量组分别灌胃给予供试品8、20、60 g 生药/（kg·d），2次/ d，每周给药6 d，周日停药。每周按所称体重计算给药量给予供试品。试验周期为26周，其中，给药周期为24周，恢复期2周。给药中期13周末、给药末期24周末、恢复期26周末随机选取数量约1/3大鼠麻醉后，腹主动脉采血，取血后对大鼠进行系统尸解，对脏器进行称重并计算脏器系数后做组织病理学检查。结果软坚消瘿颗粒长期毒性试验中，体重结果显示，给药组雌雄两性大鼠从给受试药物第1周开始到实验周期末，包括停药2周后，大鼠体重均呈渐进性减轻，并且呈剂量依赖性。脏器系数统计结果结合病理学报告统筹分析，未见受试物对脏器系数指标有明显影响。组织病理学显示大鼠各个脏器中期、末期、恢复期软坚消瘿颗粒低、中、高3个给药组大鼠，各组织、器官未见病理性变化。结论软坚消瘿颗粒按试验的剂量服用安全，对大鼠无明显的毒副作用。
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软坚消瘿颗粒对AIT大鼠甲状腺组织形态及血清抗体水平影响的研究
目的:观察软坚消瘿颗粒对自身免疫性甲状腺炎(AIT)大鼠甲状腺组织病理形态的变化及血清抗体甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、过氧化物酶抗体(TpoAb)水平的影响.方法:将猪甲状腺球蛋白与弗氏佐剂溶合免疫注射配合饮用高碘碘水建立AIT大鼠模型,分为模型组及软坚消瘿颗粒高、中、低剂量组,分别给予蒸馏水及高、中、低剂量的软坚消瘿颗粒灌胃6周.采用电化学发光法检测大鼠血清TGAb、TpoAb的水平.光镜下观察甲状腺组织病理形态学改变.结果:模型组与正常组比较TGAb、TpoAb具有显著性差别(P＜01),软坚消瘿高、中剂量组与模型组比较TGAb、TpoAb有显著差别(P＜0.05).光镜下观察雷公藤组及各中药治疗组甲状腺组织结构损伤轻于模型组.结论:软坚消瘿颗粒可能通过降低AIT大鼠血清抗体水平,改善自身免疫性甲状腺炎的免疫紊乱状况,从而起到减轻甲状腺病理损伤的作用.
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软坚消瘿颗粒对AIT大鼠甲状腺组织凋亡蛋白影响的研究
目的:观察软坚消瘿颗粒对自身免疫性甲状腺炎(AIT)大鼠甲状腺组织凋亡蛋白的影响.方法:将猪甲状腺球蛋白与弗氏佐剂溶合免疫注射配合饮用高碘碘水建立AIT大鼠模型,采用电化学发光法检测大鼠血清TGAb、TpoAb水平,采用免疫组织化学法测定大鼠甲状腺组织凋亡蛋白Fas Fas-L Bax Bcl-2的表达.结果:TGAb、TpoAb模型组与正常组比较具有显著性差别(P＜0.01).Fas、Fas-L、Bax模型组与正常组比较具有显著性差别(P＜0.01)；各中药治疗组与模型组比较均具有显著性差别(P＜0.01)；软坚消瘿颗粒高剂量组与雷公藤组比较有显著性差别(P＜0.01).雷公藤组及各中药治疗组与正常组比较Fas、Fas-L、Bax表达依然略高,但与模型组比较,均明显降低.Bcl-2模型组与正常组比较具有显著性差别(P＜0.01)；各中药治疗组与模型组比较均具有显著性差别(P＜0.01)；软坚消瘿颗粒高剂量组与雷公藤组比较有显著差别(P＜0.01).雷公藤组及各中药治疗组与正常组相比较Bcl-2表达有一定差异,但与模型组相比较,均明显升高.结论:软坚消瘿颗粒通过改善凋亡蛋白的病理形态结构从而有效改善自身免疫性甲状腺炎的病理状态.
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软坚消瘿颗粒中挥发油提取及β-环糊精包合工艺研究
目的:优选软坚消瘿颗粒的挥发油提取及β-CD包合物工艺.方法:以挥发油得率,挥发油包合率为指标,采用L9(34)正交实验设计,优选挥发油提取及β-CD包合物工艺.结果:佳提取工艺为用6倍量水浸泡药材2h,水蒸气蒸馏法提取6h.佳包合工艺为 β-CD:软坚消瘿颗粒挥发油=10∶1(g· mL-1),包合温度为40℃,包合时间为1.5h；A2 B3 C3为优选出的佳工艺方案.结论:本工艺包合物含量较高,工艺稳定且操作简便,可用于软坚消瘿颗粒的生产中.
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软坚消瘿颗粒对AIT大鼠细胞因子Th1/Th2及凋亡蛋白Fas/FasL、Bcl-2/Bax的影响
目的 通过对AIT大鼠软坚消瘿汤改变剂型后颗粒剂的疗效,观察细胞因子(Thl/Th2)及甲状腺细胞凋亡相关调控蛋白Fas/FasL、Bcl-2/Bax的影响,并探讨其作用机制.方法 将48只雌性大鼠按体重大小随机分为4组,即正常组、模型组、雷公藤组、软坚消瘿颗粒组.造模采用腹部皮下多点免疫注射猪甲状腺球蛋白与弗氏佐剂溶合物,同时配合饮用高碘水制备AIT大鼠模型.经过6 w治疗后,检测以下指标:采用免疫组化法测定大鼠细胞因子Th1,Th2及甲状腺组织凋亡蛋白Fas、Fas-L、Bax、Bcl-2的表达;同时测定以上4种凋亡蛋白的灰度值.结果 (1)凋亡蛋白的变化:模型组与正常组比较Fas、Fas-L、Bax显著升高,Bcl-2显著降低(P＜0.01);疗后软坚消瘿颗粒组及雷公藤组与模型组比较有显著差异(P＜0.01);治疗二组比较无显著性差异(P＞0.05);(2)细胞因子Th1/Th2的变化:模型组与正常组比较Th1/Th2显著升高(P＜0.01);疗后软坚消瘿颗粒组及雷公藤组与模型组比较有显著差异(P＜0.01);治疗二组比较无显著性差异(P＞0.05).结论(1)软坚消瘿颗粒组及雷公藤组可有效降低细胞因子Th1/Th2,从而起到治疗作用;(2)软坚消瘿颗粒组及雷公藤组通过调控凋亡蛋白,起到抑制细胞凋亡的作用,从而减轻或延缓本病的发生与发展.
关键词： 自身免疫性甲状腺炎 软坚消瘿颗粒 细胞因子(Th1/Th2) 凋亡蛋白
