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  • 基于HPLC-MSn和化学计量学的指纹图谱在毛诃子鞣质部位质量评价中的应用

    作者:陈文静;梁文仪;李师;吴玲芳;崔雅萍;亓旗;叶婷;梁林金;张兰珍

    目的:建立毛诃子鞣质部位HPLC指纹图谱.方法:采用Atlantic T3(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.2%冰醋酸水溶液,梯度洗脱,流速1.0 mL· min-1,进样量20μL,柱温30℃.采用相似度软件和SPSS、SIMCA软件对11批毛诃子鞣质部位的色谱数据进行化学计量学分析.结果:标定出20个共有峰.结果显示11批毛诃子鞣质部位相似度在0.832-0.973之间,只有新疆产地药材的鞣质部位的相似度在0.9以下.聚类分析将鞣质部位大致分为3类,与主成分分析结果一致.偏小二乘判别分析找到1、13和14号峰可能是鉴别毛诃子样品主要的色谱峰.采用HPLC-MSn方法总结出毛诃子鞣质部位中14个化合物的液质信息.结论:将毛诃子鞣质部位HPLC指纹图谱数据采用化学计量学分析方法进行分析,方法快速、简便、重复性好,可作为藏药毛诃子鞣质部位质量控制有效方法之一.

  • 藏药余甘子鞣质部位主要药效成分在人工胃肠液中的稳定性研究

    作者:吴玲芳;叶婷;梁林金;梁文仪;陈文静;李师;崔亚萍;亓旗;张兰珍

    目的:研究余甘子鞣质部位主要药效成分在人工模拟胃、肠液中的稳定性,为余甘子体内代谢研究提供依据.方法:采用人工模拟胃液、肠液,体外温孵,HPLC-UV法测定余甘子鞣质部位中主要药效成分的含量变化情况;分别考察余甘子鞣质部位主要药效成分在人工胃肠液中的稳定性.结果:余甘子鞣质部位中主要药效成分没食子酸、柯里拉京、鞣花酸在人工胃液中比较稳定,含量变化不明显,降解剩余量在100%左右波动,半衰期大于90 h;在人工肠液中不稳定,含量先增加后减少,降解剩余量在100-300%之间波动,半衰期大于10h.结论:余甘子鞣质部位主要药效成分在人工胃液中比较稳定,各成分含量变化不明显;余甘子鞣质部位主要药效成分在人工肠液中不稳定,主要成分含量先增加后减少,推测大分子可水解鞣质可以转化成小分子成分,但是随着时间延长所有成分均在降解.

  • 藏药余甘子药材及其鞣质部位的指纹图谱评价研究

    作者:孙雪飞;张鸿雁;夏青;赵海娟;吴玲芳;张兰珍;石任兵

    建立不同产地藏药余甘子药材及其鞣质部位HPLC指纹图谱.采用Diamonsil C18(4.6 mm ×250 mm,5μm)色谱柱,甲醇-0.2%冰醋酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速1 mL·min-1,柱温30℃,检测波长260 nm.提取13个色谱峰为药材指纹图谱共有峰,11个色谱峰为鞣质部位指纹图谱共有峰,采用对照品指认了5个主要色谱峰,运用相似度评价软件对所收集的8个不同产地藏药余甘子药材及其鞣质部位进行系统比较与归类,8个余甘子药材相似度在0.763~0.993,鞣质部位相似度在0.903~0.991,通过聚类分析、主成分分析将不同产地的余甘子药材和鞣质部位分别聚为3类.该法重复性好,简便可靠,为不同产地藏药余甘子药材及其鞣质部位质量控制和评价提供依据.

  • 藏药余甘子鞣质部位对HT1080细胞迁移与侵袭能力的影响研究

    作者:赵海娟;龚曼;常青;游云;张兰珍

    目的:探讨藏药余甘子鞣质部位对人纤维肉瘤细胞(HT1080)迁移和侵袭能力的影响。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测余甘子鞣质部位对HT1080细胞活力的影响。分别采用划痕实验和Transwell侵袭实验法检测余甘子鞣质部位对HT1080细胞迁移和侵袭能力的影响。结果余甘子鞣质部位作用48h能够显著抑制HT1080细胞的增殖,其半数抑制浓度(IC50)为0.174g·L-1。与对照组比较,余甘子鞣质部位质量浓度为0.1g·L-1,作用3h后即可明显降低HT1080细胞迁移面积;在质量浓度为0.025g·L-1时可明显降低HT1080细胞透过胶膜的数量,降低其侵袭能力。结论余甘子鞣质部位可有效抑制人纤维肉瘤细胞迁移和侵袭能力。

  • 藏药余甘子鞣质部位对小鼠移植性肿瘤的抑制作用

    作者:冯光远;李登科;吴玲芳;张兰珍;孙震晓

    目的:研究余甘子鞣质部位对荷肉瘤 S180和肝癌 H22移植瘤小鼠的肿瘤抑制作用及免疫器官的影响。方法将72只 SPF 级的 ICR 小鼠分为6组,分别为空白对照组、荷肉瘤 S180模型组、余甘子鞣质部位低(0.5 g·kg-1,相当于生药3.64 g·kg-1)、中(1.0 g·kg-1,相当于生药7.27 g·kg-1)、高(2.0 g·kg-1,相当于生药14.54 g·kg-1)剂量组,另设环磷酰胺组阳性药组;对荷肝癌 H22小鼠的抑瘤实验分组同上。小鼠分别连续 ig 给药10 d 及12 d 后,计算抑瘤率、胸腺指数和脾脏指数。结果余甘子鞣质部位低、中、高剂量组对荷肉瘤 S180移植瘤小鼠组的抑瘤率分别为16.52%、40.08%(P <0.05)、56.19%(P <0.01),对荷肝癌 H22移植瘤小鼠组的抑瘤率分别为18.36%、34.01%(P <0.05)、51.02%(P <0.01)。与模型组相比,余甘子鞣质部位低、中、高剂量组小鼠的胸腺指数和脾脏指数均无显著性差异(P >0.05)。结论灌胃给予余甘子鞣质部位对两种荷瘤小鼠的肿瘤生长均有明显的抑制作用,且呈一定剂量依赖性,对荷瘤小鼠免疫器官未见明显影响。

  • 人肠内菌对藏药余甘子鞣质部位代谢的研究

    作者:杨光辉;吴玲芳;张晓雪;朱丹;邵岩岩;毛鑫;梁文仪;陈文静;石任兵;张兰珍#

    目的:研究人肠内菌对藏药余甘子鞣质部位的代谢。方法采用人肠内菌与余甘子鞣质部位在厌氧条件下,37℃共温孵培养的方法进行代谢,代谢样品通过离心、甲醇沉淀蛋白后,运用HPLC-MS n法对代谢物进行定性分析,运用HPLC-UV法对样品进行定量分析,并绘制时间含量曲线。结果余甘子鞣质部位在人肠内菌作用下用HPLC-MSn检测出13个成分,其中4个为代谢成分焦性没食子酸、甲基没食子酸、尿石素B和尿石素A;4个为原型成分没食子酸、柯里拉京、galloyl glucose、digalloyl glucose和5个待指认成分。样品中没食子酸、柯里拉京、鞣花酸3个指标性成分的含量随人肠内菌代谢时间延长呈先增加后减少的趋势。结论余甘子鞣质部位可被人肠内菌代谢,代谢后其原型活性成分仍有保留,并且有新生成的抗癌活性成分出现。

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