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三伏天灸与三伏针刺对免疫学影响的对比研究
目的:将三伏天灸与三伏针刺对免疫学影响进行观察对比.方法:将162例支气管哮喘患者随机分为三伏天灸组和三伏针刺组,天灸组以甘遂、白芥子、麻黄、细辛等药物各等份,上加0.1g麝香制成的1cm×1cm大小药膏分别于初伏、中伏和末伏在肺俞、定喘等穴位进行贴敷治疗,3次为1疗程.针刺组在初伏开始对以上穴位进行针刺,隔天1次,30天为1疗程.一疗程后分别观察两组的IgE、淋巴细胞转换率、嗜酸性粒细胞计数的变化并对比.结果:三伏天灸组与三伏针剌组治疗后的血清IgE、淋巴细胞转换率、嗜酸性粒细胞计数均较治疗前有改善(P＜0.05),天灸组较针刺组在降低IgE和嗜酸性粒细胞计数方面有显著性差异(P＜0.05).结论:三伏天灸与三伏针刺比较,在对免疫学方面的影响更具优势,提示天灸疗法主要通过时间、经穴及药物三重作用提高人体的免疫机能.
关键词： 支气管哮喘/天灸疗法 IgE LTR 嗜酸性粒细胞计数 针刺 -
牛泡沫病毒内部启动子的克隆及功能分析
以该实验室分离并鉴定的牛泡沫病毒(BFV)中国毒株(BFV3026)为材料,用PCR方法首次克隆了位于env基因3'端的内部启动子,经序列分析后,引入luc基因作瞬时表达分析.结果表明,该内部启动子不但基础活性高于LTR,而且转录活性在Tas参与下被大大激活,其激活活性也远远高于LTR.同源分析表明,非灵长类泡沫病毒内部启动子之间的同源性高于其与灵长类泡沫病毒内部启动子之间的同源性.
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马传染性贫血病毒非编码区LTR嵌合克隆的生物学特性
将已构建的马传染性贫血病毒LTR强弱毒嵌合克隆衍生毒vLGFD9-12体内接种健康试验马,在150d观察期内,各组试验动物体症均未见异常.血液学分析发现,vLGFD9-12嵌合克隆衍生病毒与亲本弱毒疫苗株的白细胞与血红蛋白含量总体上没有明显的规律性的变化.在动物外周血中均检测到一定的病毒RNA拷贝数,但拷贝数较低.二者在诱导EIAV特异性淋巴细胞增殖功能和特异性细胞毒性杀伤反应中,亦具有相似的变化趋势和效应.本项研究为进一步确定我国马传贫弱毒疫苗株毒力致弱及免疫保护的分子机制奠定了重要的分子生物学基础.
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RNA结合域决定JDV Tat具有较强的激活能力
为分析JDV与BIV、HIV-1 LTR和Tat相互激活能力差异的原因,在氨基酸序列对比及HIV-1 Tat功能域划分的基础上构建了JH、HJ、JB、BJ几种嵌合Tat蛋白,并克隆到真核表达载体.将上述表达质粒与以JDV、BIV和HIV-1 LTR为启动子,以luc为报告基因的质粒共转染Hela细胞,证实了三种不同Tat激活能力的差异主要来自其结合域RNA结合能力的差异,排除了结构域不完整和细胞因子缺乏造成JH不激活HIV-1 LTR的可能性.
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马传染性贫血病毒基因非编码区LTR嵌合克隆的构建
在已有全长感染性克隆pLGFD3-8和pD70344的基础上,根据马传贫弱毒疫苗致弱过程中不同代次毒株LTR序列的分析,在LTR U3区选取特定的酶切位点对EIAV非编码区LTR基因进行了部分替换.将替换的全基因克隆转染驴胎皮肤细胞(FDD)并以驴白细胞(DL)传代,用逆转录酶活性检测、RT-PCR方法及Real-time RT-PCR验证其感染性.结果发现,其衍生病毒感染上述两种细胞均出现明显的细胞病变;细胞培养上清可检测到RT酶活性和RT-PCR阳性.电镜下可见大量典型的EIAV颗粒.pLGFD9-12嵌合克隆衍生病毒与其父本克隆衍生病毒pLGFD3-8具有相似的复制水平,pLGFD9-12嵌合克隆衍生病毒在DL细胞上复制水平略高于FDD细胞.此结果为进一步深入研究LTR对马传染性贫血病毒复制水平和毒力的影响奠定了基础.
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JDV与三种牛反转录病毒相互关系的初步研究
为研究JDV与其它三种牛反转录病毒BIV、BLV、BFV的相互作用关系,将以JDV、BIV、BLV、BFV的LTR为启动子,以Luc为报告基因的质粒和以上病毒反式激活因子的表达质粒共转染BL12细胞系,通过瞬时表达分析试验证明了JDV和BIV的LTR和Tat之间亲缘关系很近,能够相互激活;JDV Tat可以反式激活BLVLTR,BLV Tax不能激活JDV LTR;JDV LTR上存在BFV Tas的应答元件;BLV、BFV和BIV的LTR和反式激活因子间不存在相互激活.
