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Toll样受体7在肠道病毒71型感染人Jurkat T细胞诱导炎症因子中的作用
目的：研究Toll样受体(TLRs)在肠道病毒71型(EV-A71)感染人T细胞中的表达情况，阐明其在EV-A71致炎症反应机制中的作用。方法 EV-A71毒株由深圳市CDC于2014年从手足口病患儿粪便中分离，接种200μl病毒滴度为103细胞培养半数感染量（CCID50）/ml的病毒液于人Jurkat T细胞，不同感染时间后，采用RT-PCR方法检测TLR1~TLR10 mRNA表达情况；采用Real-time PCR分析TLR7 mRNA变化水平；采用Western blot分析TLR7相关接头分子髓样分化因子(MyD88)表达水平；采用ELISA检测培养上清细胞因子白细胞介素(IL)-6、IL-8和肿瘤坏死因子α（TNF-α）的分泌水平。结果 Real-time PCR检测结果显示，感染6、12、24和48 h ，感染组TLR7 mRNA的相对表达水平分别为1.26±0.15、1.75±0.20、2.26±0.23和3.74±0.62,与对照组差异有统计学意义（t值分别为-2.96、-6.38、-9.57、-7.71，P值均<0.05）；Western blot结果显示，感染24 h和48 h时，感染组MyD88蛋白表达水平与对照组相比分别增加1.34和2.17倍；细胞因子检测结果显示，感染24 h和48 h时，IL-6的分泌水平分别为（302.86±38.11）、（179.70±14.50）pg/ml，高于对照组24 h和48 h的分泌水平[（176.42±9.60）、（179.70±14.50）pg/ml]，差异有统计学意义（t值分别为-5.57、-18.54，P值均<0.05）。48 h感染组TNF-α分泌水平为（100.81±9.81）pg/ml ，高于对照组[（56.19±6.94）pg/ml]，差异有统计学意义（t=-6.43，P=0.003）。结论EV-A71主要通过TLR7被免疫活性细胞识别，进而激活TLR7相关信号通路，诱导产生大量促炎因子来参与感染致炎症反应的病理过程。
关键词： 肠道病毒71型 Toll样受体 人Jurkat T细胞 细胞因子
