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壳聚糖-SiO_2杂化膜文献资料
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壳聚糖-SiO_2杂化膜酶免疫传感器的研制及其快速检测副溶血性弧菌的评价
目的 为改善已有免疫传感器存在的关键技术问题--生物敏感元件的固定化方法 及其生物活性的保持,研制壳聚糖(CS)-SiO_2杂化膜酶免疫传感器,并对研制的新型传感器进行评价.方法 采用溶胶-凝胶法制备CS-SiO_2杂化膜,将辣根过氧化物酶标记的副溶血性弧菌抗体(HRP-anti-VP)掺杂于该杂化膜中,制备副溶血性弧菌酶免疫电极.通过循环伏安法表征免疫电极和监测酶促反应,根据免疫反应前后还原峰电流降低率(DP)来实现对副溶血性弧菌的检测.选择溶藻弧菌等7种菌进行特异度实验.结果 通过研究3种膜的红外光谱得出,CS-SiO_2杂化复合膜制备成功,HRP-anti-VP被固定于杂化膜中.在优化的免疫反应条件及电化学检测条件下,在10~4～10~9 cfu/ml浓度范围内,免疫电极免疫反应前后还原峰电流下降的DP与副溶血件弧菌浓度C的对数呈线性关系,线性回归方程为DP=6.5 lgC-3.319,线性相关系数0.9958,检出限为6.9×10~3cfu/ml[信/噪比(S/N)=3].该免疫电极具有较好的特异度、重现性[相对标准偏差(RSD)<6%]、稳定性(1周后电流响应为初始值的95%)和准确性(与GB/T4789.7-2003的符合率为96.7%).结论研制出的CS-SiO_2杂化膜酶免疫传感器用于快速筛检副溶血性弧菌效果良好.
