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与人类疾病有关的沙粒病毒研究进展
沙粒病毒为单股负链分节段的RNA病毒,迄今已知仅一个科一个属,分为旧世界沙粒病毒(Old World Arenavimses)和新世界沙粒病毒(New World Arenaviruses)两大类,有20余种血清型,其中大多数种类可引起人类严重疾病,如拉沙病毒(Lassa virus)引起拉沙热,胡宁病毒(Junin virus)引起阿根廷出血热,马秋博病毒(Machupo virus)和Chapare病毒引起玻利维亚出血热,瓜纳瑞托病毒(Guanarito virus)引起委内瑞拉出血热,沙比亚病毒(sabi(a) virus)引起巴西出血热,淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)引起淋巴细胞脉络丛脑膜炎.本文对沙粒病毒及其引起的主要疾病的研究进展作一综述.
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沙粒病毒属四步法一致-简并杂合寡核苷酸引物实时荧光PCR检测体系的建立
目的 建立沙粒病毒属四步法一致-简并杂合寡核苷酸引物(CODEHOP)实时荧光PCR(Real-time PCR)检测体系.方法 设计1对沙粒病毒属的一致-简并引物,分析Real-time PCR的扩增曲线和熔解曲线,根据引物二聚体(PDs)和扩增产物的熔解温度(Tm)值,在通用的三步法延伸步骤之后,增加5s的恒温荧光检测步骤,在PDs和特异性扩增产物的熔解温度之间进行荧光检测温度的优化,建立四步法CODEHOP Real-time PCR方法,评价其灵敏度、特异性和重复性.结果 PDs的Tm值为75.32～76.86℃,特异性扩增产物的Tm值为86.84℃,增加一步温度为84℃,荧光检测步骤可有效去除PDs对检测结果的影响,该方法特异性为100％,病毒RNA检测灵敏度为59.6 pg,重复性良好,变异系数＜5％,12份鼠肺盲样的检测结果符合预期.结论 建立的沙粒病毒四步法CODEHOP Realtime PCR检测方法敏感、特异,可用于鼠类沙粒病毒感染检测.
关键词： 沙粒病毒 一致-简并杂合寡核苷酸引物 实时荧光PCR -
沙粒病毒进入抑制剂体外药效学评价模型的建立
沙粒病毒是一类有囊膜的RNA病毒.以哺乳动物为宿主的沙粒病毒(mammarenavirus)中,有9种可致人疾病,其中8种可致人出血热.拉沙病毒(Lassa virus,LASV)感染人所致拉沙出血热(Lassa hemorrhagic fever)流行范围广,有引发疾病大流行的可能,因此拉沙病毒被列为第一类病原微生物.目前针对沙粒病毒的疫苗和药物极为有限.本研究应用重组病毒技术,以HIV-1为核心,共构建了以9种沙粒病毒外壳蛋白包裹的重组病毒(arenavirus-GP/HIV-luc),在考察了它们对17株人、猴、鼠及蝙蝠的不同组织来源细胞进入水平的基础上,建立了沙粒病毒进入抑制剂药理活性评价模型,并用工具药验证.本研究建立的重组沙粒病毒进入抑制剂体外药效学评价模型特异性好,安全性高,可在生物安全二级(BSL-2)实验室进行实验,可为抗沙粒病毒药物和疫苗的活性评价提供技术平台,促进针对沙粒病毒出血热的药物及疫苗的研发.
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宁波野生鼠类携带的沙粒病毒检测和种系进化分析
目的：对宁波地区野生鼠类携带的沙粒病毒进行检测并分析病毒基因序列特征。方法设计沙粒病毒L、S基因的简并引物，采用RT‐PCR方法对宁波口岸捕获的鼠类样品进行沙粒病毒检测，分离病毒，对PCR产物进行测序及系统发生分析。结果共检测73份鼠类样品，其中12份褐家鼠经检测为阳性，分离获得沙粒病毒株DX1401，该病毒株S片段扩增片段大小为413 bp ，L片段扩增大小1204 bp。S片段的系统发生分析显示DX1401与Mobala病毒株ACAR3080位于同一分支，与Mobala病毒株ACAR3080遗传距离为接近，值为0．467；L片段的系统发生分析显示DX1401与Lassa病毒株Jo‐siah、NL、Z148、Bamba‐R114、Soromba‐R、Nig08‐A37、Nig08‐A47，Mobala病毒株 ACAR3080，Morogoro病毒株13017／2004， Mopeia病毒株Mozambique、AN 21366‐BNI位于同一组，与Mobala病毒株ACAR 3080遗传距离为接近，值为6．953。结论本研究证实了宁波地区野生鼠类中存在沙粒病毒流行。
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沙粒病毒及所致人类疾病的研究进展
沙粒病毒(Arenaviruses)属于沙粒病毒科(Arenaviridae),现分为爬行动物沙粒病毒属(Reptarenavirus,RARV)、哈特曼病毒属(Hartmanivirus,HARV)和哺乳动物沙粒病毒属(Mammarenavirus,MARV)3个属,分别以爬行动物和啮齿动物为宿主.沙粒病毒,特别是MARV可引起人类病毒性出血热,主要分布于非洲和美州,近几年来,亚洲也有病例报道,特别是我国鼠类中也证实存在一类新型沙粒病毒的感染,引起人们的关注.本文就沙粒病毒的结构、分类、疫苗、治疗及所致人类疾病的研究进展进行了综述.
