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同源框基因HOXAll顺式作用元件具有启动子活性及孕激素应答元件功能
目的:探讨HOXA11基因顺式作用元件是否存在启动子及孕激素应答元件序列.方法:采用PCR技术以人基因组DNA为模板.扩增含HOXA11顺式作用元件序列的DNA片段;将扩增片段与无启动子的强化绿色荧光蛋白报告基因载体pEGFP-1多克隆位点连接,构建HOXA11基因顺式作用元件的表达载体pEGFP-HOXA11;用脂质体法将表达载体转染到Ishikawa细胞中,在荧光显微镜下观察重组HOXA11基因顺式作用元件的启动活性,以及转染细胞经孕酮处理后细胞内绿色荧光蛋白表达水平的变化.结果:成功地将HOXA11基因顺式作用元件克隆到报告基因载体pEGFP-1中,酶切和PCR鉴定以及DNA序列分析无误;转染pEGFP-HOXA11,表达载体的Ishikawa细胞能表达发出绿色荧光的报告基因蛋白,而且经孕酮处理后绿色荧光强度明显增强.结论:HOXA11基因顺式作用元件具有启动子活性和孕激素应答元件功能.
关键词: HOXAll基因 顺式作用元件 表达载体 Ishikawa细胞 -
原位杂交检测同源框基因HoxAll在人月经周期子宫内膜的表达
了解HoxAll基因在人月经周期子宫内膜的表达及变化,探索该基因对正常内膜周期的调节功能.应用地高辛标记的RNA探针进行原位杂交.HoxAll基因主要在内膜间质细胞中表达,增殖期与分泌期比较未见明显差异.腺上皮细胞中HoxAll基因的表达量虽较间质细胞少,但有明显的周期性变化,以增生殖期腺上皮细胞表达量较高,分泌早期开始下降,到分泌中晚期表达量极低或不表达.HoxAll基因在月经周期人子宫内膜中的这种表达时空的变化与孕酮受体(PR)非常相似,提示HoxAll基因的表达与卵巢激素及其受体的调控有着密切的关系,HoxAll在分泌中期内膜腺上皮中表达下降是内膜分化的重要指标志.