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4-二硝基苯肼(DNPH)内标文献资料
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HPLC法测定大鼠血浆中乙醛的含量
目的:建立检测大鼠血浆中乙醛(ACH)浓度的HPLC方法.方法:选择正丁醛-2,4-二硝基苯肼(DNPH)为内标,采用ZORBAX Eclipse XDB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-乙腈-水(25:35:40,v/v、v)为流动相,流速1.0 mL· min-1,在紫外波长为360 nm处检测.血浆样品需经乙腈沉淀蛋白,离心后取上清与DNPH发生衍生化反应,正己烷-乙酸乙酯(5:1,v/v)萃取衍生化产物ACH-DNPH,进行高效液相色谱测定.结果:乙醛在0.05~10.00 μg·mL-1浓度范围内线性关系良好(r =0.9999),检测限为0.01 μg· mL-1,定量限为0.05 μg·mL-1;高、中、低3个浓度的相对回收率为102.7% ~109.0%;日内RSD为1.6% ~4.3%,日间RSD为3.3% ~6.3%.结论:本法可用于大鼠体内乙醇代谢动力学研究.