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IFN-γ通过诱导上皮间质转化增强人乳头状甲状腺癌细胞株的侵袭转移能力
目的:观察IFN-γ对人乳头状甲状腺癌细胞株TPC-1侵袭和转移能力的影响,并探讨上皮间质转化过程(EMT)在其中的作用.方法:采用划痕愈合实验和Transwell侵袭实验检测IFN-γ对TPC-1侵袭转移能力的影响;实时定量PCR和Western检测EMT标志物E-cadherin,N-cadherin,Vimentin的mRNA水平及蛋白水平变化;免疫荧光检测上述标志物的定位表达.结果:划痕愈合实验和Transwell侵袭实验结果显示:IFN-γ增强了TPC-1的侵袭转移能力(P<0.05),实时定量PCR结果显示EMT的上皮标志物E-cad-herin的mRNA表达水平明显下降,间质标志物Vimentin的mRNA表达上调,而N-cadherin的mRNA未见明显变化.Western结果显示E-cadherin在IFN-γ作用下表达下调;N-cadherin与Vimenin表达上升;免疫荧光结果与Western结果一致.结论:INF-γ可以通过诱导EMT,促进TPC-1侵袭转移,提示炎性介质IFN-γ可能参与人乳头状甲状腺癌的侵袭转移.
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维甲酸对甲状腺癌ASC蛋白的影响
目的 探索维甲酸诱导甲状腺癌细胞的凋亡情况及凋亡相关斑点样蛋白(ASC)的表达.方法 甲状腺滤泡状癌细胞株FIE-133(A组),乳头状甲状腺癌细胞株W3(B组),未分化甲状腺癌细胞株8505C(C组),3组细胞用维甲酸刺激24h共同培养.流式细胞术观察细胞活性,RT-PCR和Western blotting检测ASC mRNA及蛋白的表达.采用双向电泳分离蛋白质,采用PDQuest2 -DE软件分析维甲酸+A组与A组细胞2组间差异表达的蛋白质斑点,并用Western blotting进一步验证.结果 流式细胞术结果,维甲酸均导致3组细胞凋亡,A组的凋亡率强于B、C2组(P＜0.01).RT-PCR和Western blotting检测的ASC mRNA及蛋白的表达,A、B、C3组均有表达,A组强于B、C2组(P＜0.05).维甲酸作用A组,质谱鉴定了ASC蛋白,Western blotting验证蛋白质ASC与双向电泳的结果一致.结论 为维甲酸治疗甲状腺癌的蛋白质研究提供实验资料.
