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转位肽文献资料
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转位肽/粒酶B融合蛋白基因的构建、表达及对细胞生长的抑制作用
目的:研究转位肽/粒酶B融合蛋白对细胞生长的抑制作用.方法:采用重组PCR法,将绿脓杆菌外毒素(PE)部分转位肽编码序列与活性型粒酶B(GrBa)基因相融合,构建PE Ⅱ-GrBa融合蛋白基因,以粒酶活性中心丝氨酸突变的PE Ⅱ-mGrBa作为阴性对照.将所获重组基因克隆入真核表达载体pcDNA3和pIRES2-EGFP中,以脂质体法瞬时转染Hela等细胞系,通过与GFP共表达,用MTT比色、TUNEL及间接免疫荧光染色,检测PE Ⅱ-GrBa基因的表达对转染细胞的形态和生长的影响.结果:表达PE Ⅱ-GrBa融合蛋白的细胞的细胞骨架发生异常,细胞生长受到抑制,部分细胞呈现凋亡特征.结论:PE Ⅱ-GrBa融合蛋白的表达可抑制细胞生长.
