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TRAb间接ELISA测定的建立
为了解不同类型TRAb在Graves病中的作用及满足大规模筛选TRAb的需要,我们利用可溶性膜受体技术建立了TRAb的间接ELISA测定.利用猪的TSHr作为包被抗原,HRP-羊抗人Ig(A+G+M)为二抗可以检出IgG、IgM、IgA型TRAb的总体.若分别以HRP-羊抗人IgG/IgM为二抗则可以分别检出IgG型/IgM型TRAb.该法与TBⅡ放射受体检测试剂盒有很好的相关性(r＝0.708),可应用于临床,尤其适用于杂交瘤技术中的大规模抗体筛选.
关键词： Graves'病 促甲状腺素受体自身抗体 酶联免疫吸附测定 -
用重组 hTSHR 胞外段测定女性 AITD 患者 TRAb的研究
目的应用重组人促甲状腺素受体胞外段（hTSHRecd）蛋白在自身免疫性甲状腺病（AITD）患者中用以间接酶联免疫吸附法（ELISA）检测TSH受体抗体（TRAb），建立一种简便快捷、敏感性及特异性均高的新的TRAb测定方法。方法病例组：女性，Graves甲亢（ GD）患者59例，其中初诊23例；原发性甲状腺功能减退患者63例。对照组：非AITD甲状腺病（甲状腺囊肿或腺瘤，甲状腺功能正常）43例；正常对照50例。将重组hTSHRecd蛋白稀释成10μg/mL，包被酶标板，利用间接ELISA法测定上述各组样本血清TRAb，以放射受体分析（ RRA）检测法为对照。结果间接ELISA法测定TRAb，各组OD450值分别为：正常对照组0．27±0．12，非AITD对照组0．32±0．26，GD甲亢组0．96±0．78，甲减组0．48±0．39。 GD甲亢及甲减组与两个对照组相比均有显著性差异（GD甲亢t1＝6．79，t2＝6．30；甲减t1＝4．27，t2＝3．26，均P＜0．01）。用ELISA法和RRA法在AITD患者组中检测TRAb的阳性率分别为：GD甲亢组76．27％、81．36％，经比较无显著性差异（χ2＝0．57，P＞0．05）；初诊GD甲亢组86．96％、91．30％，经比较无显著性差异（χ2＝0．00，P＞0．05）；甲减组34．92％、39．68％，经比较无显著性差异（χ2＝0．57，P＞0．05）。用两种方法测得的TRAb活性值有相关性（r＝0．577925，P＜0．05）。结论重组hTSHRecd蛋白与AITD患者血清有良好的反应性。间接ELISA法检测高效、简便、费用低，无同位素污染，在作为临床常规检验中优于RRA。
