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软组织填充材料聚氨酯微球的制备及体外生物相容性研究
目的 制备生物医用聚氨酯微球,对其理化性能及体外生物相容性进行评价.方法采用自乳化法 (乳化速率分别为l 000、2 000、3 000、4 000 r/min)制备聚氨酯微球,采用傅里叶变换红外光谱仪测试聚氨酯微球的分子结构,扫描电镜观察微球内部结构及表面形貌,筛选佳乳化速率制备的微球进行后续实验.培养人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs),采用钙黄绿素/碘化丙啶(calcein-acetoxymethylester/pyridine iodide,Calcein-AM/PI)双染观察细胞在聚氨酯材料上的形态及生长黏附情况.分别用含1％苯酚、10％FBS的H-DMEM培养基(A组)、按GB/T 16886.12标准规定比例制备的聚氨酯材料浸提液(B组)、含10％FBS的H-DMEM培养基(C组)培养细胞,采用细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)法评价细胞活力;通过溶血实验评价血液相容性,其中浸提液作为实验组,生理盐水作为阴性对照组,蒸馏水作为阳性对照组.结果 扫描电镜观察示,乳化速率为2 000 r/min时制得的微球形态大小均较为理想,聚氨酯涂膜的表面为粗糙致密结构,内部为不均匀的多孔结构.Calcein-AM/PI双染观察示HUVECs与聚氨酯材料黏附紧密,且以绿染的活细胞为主.CCK-8检测示B、C组各时间点细胞增殖活力均显著高于A组(P＜0.05),材料细胞毒性低.溶血实验测定示,阳性对照组吸光度(A)值为0.864±0.002,阴性对照组A值为0.015±0.001,聚氨酯微球浸提液的溶血率为0.39％±0.07％(＜5％标准),无溶血作用.结论 通过自乳化法成功制备了球形度较好的聚氨酯微球,该材料有利于细胞黏附增殖、细胞毒性低,且具备良好血液相容性,有望用作软组织缺损填充材料.
