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ISCOMs作为粘膜免疫佐剂在避孕疫苗构建中的作用研究
目的探索有效提高避孕疫苗生殖道粘膜免疫的方法.方法将合成纯化的35多肽与皂甙QuilA、脂类混合物(等体积比的磷脂和胆固醇)以1∶4∶1比例混合,经充分透析后得到35肽-ISCOMs;将35肽-ISCOMs和35肽-弗氏佐剂混悬物分别免疫纯系BALB/c雌性小鼠,并比较免疫后小鼠生殖道内特异性IgA的动态变化以及小鼠生育力的变化.结果制备成功的35肽-ISCOMs在电镜下可见明显的、较规则的蜂巢样结构;35肽-ISCOMs免疫组IgA抗体在第10周时达高值(1∶600),约持续4周左右;而35肽-弗氏佐剂组IgA抗体在第14周时达高值(1∶300),约持续1周左右;35肽-ISCOMs免疫后小鼠的受孕率(14.3%)显著低于35肽-弗氏佐剂免疫组(60.0%).结论 ISCOMs可以显著提高抗原在生殖道内的粘膜免疫效应,增强抗生育作用,是一种极富潜力的粘膜免疫佐剂.
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ISCOM型白血病瘤苗对小鼠巨噬细胞作用的研究
目的 探讨免疫刺激复合物(ISCOM)型白血病瘤苗对小鼠巨噬细胞的作用.方法 将C57BL/6小鼠30只分为模型组、灭活的红白血病细胞(FBL-3)瘤苗组(灭活瘤苗组)和灭活的FBL-3细胞+ISCOM瘤苗组(ISCOM瘤苗组),小鼠注射FBL-3细胞建立白血病荷瘤小鼠模型,治疗4周后,分离小鼠腹腔巨噬细胞,观察不同组别的巨噬细胞吞噬功能、一氧化氮(NO)、白细胞介素(IL)-1、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、巨噬细胞杀伤活性和抗原呈递动能.结果 ISCOM瘤苗组小鼠腹腔巨噬细胞数量、巨噬细胞吞噬功能、IL-1、TNF-α、IL-2、T细胞增殖能力和NO高于模型组和灭活瘤苗组(P＜0.05),ISCOM瘤苗组巨噬细胞细胞杀伤活性显著高于模型组(P＜0.01).结论 ISCOM型瘤苗可以增加巨噬细胞的数量,增强巨噬细胞的吞噬作用及抗原呈递能力.
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多价精子抗原表位多肽-免疫刺激复合物的抗生育作用研究
目的提高多价小鼠精子抗原表位多肽的免疫性避孕效应.方法应用固相化学合成法合成具有两种精子抗原蛋白关键表位的35肽,纯化后的多肽与皂甙Quil A及磷脂、胆固醇混合,透析制备多肽-免疫刺激复合物(ISCOMs),并用于免疫雌性C57小鼠.结果合成后的35肽经纯化后纯度大于95%,经质谱仪鉴定质荷比与理论值一致;透析法制备的多肽-ISCOMs在电镜下呈规则的蜂巢样、由多个亚单位构成的开放型结构;免疫后小鼠的血清及阴道冲洗液中特异性IgG和IgA高分别为1∶18 000和1∶1 600;同时受孕率降为20.0%,显著低于对照组(P≤0.01).结论多肽-ISCOMs复合物具有独特的蜂巢样结构,其应用可显著提升多肽的免疫效应,尤其是粘膜免疫,获得较好的免疫性避孕效果,具有广阔的应用前景.
