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基因聚合酶链反应文献资料
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清道夫受体SR-AⅡ基因定点突变的研究
目的:利用聚合酶链反应技术对清道夫受体SR-AⅡ基因进行定点突变的研究.方法:利用聚合酶链反应定点突变技术,首先设计4条(其中2条包含预定突变位点)引物,通过3轮PCR反应扩增出含有所需突变位点的片段,通过酶切连接方法将其重组到pEGFP-C1中形成pEGFP-SRAⅡ-335质粒.结果:在真核表达载体pEGFP-SR-AⅡ-335基础上获得了SR-AⅡ cDNA A1201G和A1202C的突变体,测序结果表明在序列中发生了预期的突变,使SR-AⅡ受体蛋白第335位的赖氨酸变为丙氨酸.结论:SR-AⅡ定点突变体的构建为进一步的功能研究奠定了基础.
