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  • 提高人外周血单核细胞分离率的方法探讨

    作者:吴鹏;刘映峰;梁东辉;陈允钦

    目的:对常规的单核细胞Ficoll-Hypaque密度分离法和塑料吸附法进行改进,以提高单核细胞的分离率,减少分离时间和实验耗材.方法:以改进的Ficoll-Hypaque密度分离法和塑料吸附法为实验组,常规FicollHypaque密度分离法为对照组,评价与对比两种方法的单核细胞分层效果、单核细胞分离率、所需时间和耗材,以及细胞收集率等内容和指标.结果:抗凝血离心结束后,实验组离心管中内容物清晰地分为上、中、下三分层.在上、中层液体交界处可清晰地见到环状乳白色的单个核细胞层,分层效果较常规对照组理想.在对20mL/管抗凝全血进行单个核细胞分离的过程中,实验组平均耗时(1.18±0.08)h(n=5),对照组为(1.50±0.07)h(n=5),差异有显著性(P<0.01).在2~4 h内收集到的贴壁单核细胞在实验组为(2.12±0.13)×106/mL(n=5),对照组为(1.60±0.16)x 106/mL(n=5),差异有显著性(P<0.01).结论:改进的Ficoll-Hypaque密度分离法和塑料吸附法可明显提高单核细胞的分离率,减少了分离的时间和原料,同时也在一定程度上提高了单核细胞的收集率.该法对于需要从较大量的血液中分离出较多量的单核细胞时尤为适用,可为基础与临床细胞学研究提供一个较为有效的细胞获取途径.

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