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IL-1β和TNF-α对成骨样MG63细胞OPG和RANKL表达的影响
目的 体外环境下,探究白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对成骨样MG63细胞的核因子κB受体活化因子配体(RANKL)和骨保护素(OPG)表达的影响.方法 单独或联合使用IL-1β和(或)TNF-α刺激成骨样MG63细胞24 h,分别设为IL-1β干预组、TNF-α干预组、联合干预组(TNF-α及IL-1β联合干预),另设无任何刺激的空白组.Western blot和RT-PCR法检测RANKL和OPG蛋白及mRNA的表达.另用RANKL序列特异性小干扰RNA(siRNA)及非靶序列siRNA,经过Liopfc-ctamine 2000转染MG63细胞,非靶序列siRNA转染的细胞为阴性对照组,然后使用IL-1β和TNF-α联合刺激24 h,通过Western blot法检测RANKL和OPG蛋白的表达.结果 与空白组相比,IL-1β干预组和联合干预组的RANKL和OPG表达量明显提升(P<0.05).IL-1β及TNF-α联合干预24 h后,RANKL-siRNA转染后的MG63细胞RANKL和OPG蛋白和mRNA表达较非靶序列siRNA转染的阴性对照组显著下调(P<0.05).结论 IL-1β和TNF-α通过改变RANKL/OPG影响骨代谢,RANKL沉默可以显著降低RANKL蛋白表达,进而影响RANKL/OPG.
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纳米抗菌复合膜的结构及作为引导骨组织再生膜的生物相容性研究
目的 观察载银纳米羟磷灰石/二氧化钛/聚酰胺66 (Ag-nHA-nTiO2/PA66)纳米抗菌复合膜的物理结构及对成骨样细胞生物相容性的影响.方法 扫描电镜(SEM)和光学显微镜下观察Ag-nHA-nTiO2/PA66膜和膨体聚四氟乙烯(e-PTFE)膜的结构,在两组膜材料上接种成骨样细胞MG63,另设空白对照组.甲基噻唑基四唑(MTT)法检测MG63细胞的增殖曲线,酶联免疫法检测细胞内碱性磷酸酶(ALP)的表达,SEM下观察细胞在生物膜表面的增殖和黏附情况.结果 Ag-nHA-nTiO2/PA66膜正面疏松多孔,反面光滑致密.e-PTFE膜正反面结构相同,由成行排列的长椭圆形裂隙组成.与空白对照组相比,MTT检测显示,两种膜对MG63细胞增殖活力差异无统计学意义(P＞0.05)；ALP活性间差异也无统计学意义(P＞0.05).SEM下观察细胞在两种膜上生长良好,在Ag-nHA-nTiO2/PA66膜上细胞伸展更充分.结论 Ag-nHA-nTiO2/PA66膜对MG63细胞生长无抑制作用.与e-PTFE相比,其具有更优良的结构和生物学性能,适于用作引导骨再生膜材料.
