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人脐带间充质干细胞对感染状态下人肺泡Ⅱ型上皮细胞的影响
[目的]探讨人脐带间充质干细胞(hUCMSC)对感染铜绿假单胞菌(PA)状态下人肺泡Ⅱ型上皮细胞(A549)的影响.[方法]人肺泡Ⅱ型上皮细胞A549(1×105/mL)2 mL与PA(3×104 CFU/mL)2 mL共培育6 h后,加入hUCMSC(1×106/mL)2 mL为实验组,加入等量磷酸缓冲液(PBS)为感染组,A549与PBS及培养基共培育为对照组.比较组间A549细胞形态学改变(透射电镜),A549细胞存活率(CCK-8新型细胞增殖检测试剂盒),A549细胞凋亡率(Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞仪)以及A549肺表面活性物质A(SP-A)表达量(Western Blot).[结果]电镜细胞形态学观察显示,感染组A549细胞受损明显,胞质出现空泡变性,染色质高度凝集,可见凋亡小体;实验组细胞包膜结构完整,核膜完整,核仁明显,核染色质电子密度低,染色质均一,未见凋亡小体;对照组A549细胞结构完整,细胞膜表面微绒毛丰富,核膜完整,核周间隙结构正常,染色质均一;感染组与对照组相比,感染组A549细胞细胞存活率显著降低[(70.35±2.89)%与(97.37±2.07)%,n=3,P<0.01],凋亡率显著增加[(8.63%±0.16)%与(2.55±0.11)%,n=3,P<0.01],SP-A表达显著降低[(0.105±0.01)与(0.232±0.015),n=3,P<0.01];实验组与感染组相比,实验组细胞存活率显著增加[(85.69±3.07)%与(70.35±2.89)%,n=3,P<0.01],凋亡率显著下降[(6.34±0.12)%与(8.63±0.16)%,n=3,P<0.01],感染组中,PA可能损伤A549细胞,使其SP-A表达量著减少(n=5,P<0.05),实验组中,hUCMSC可能对感染后A549细胞的保护作用,其SP-A表达量增加(n=5,P<0.05).[结论]hUCMSC能抑制感染状态下的A549细胞凋亡,保护A549细胞分泌SP-A.
关键词： 人脐带间充质干细胞 人肺泡Ⅱ型上皮细胞(A549) 细胞凋亡 SP-A
