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精子蛋白表达下调在成人弱精症中的意义分析
目的:探讨精子蛋白表达下调在成人弱精症中的意义.方法:用iTRAQ标记以及二维高效液相色谱/串联质谱联用的方法研究成年男性正常精子以及轻、中、重度弱精症患者的精子蛋白表达情况.结果:以正常组作为参照,本研究共发现1 073个蛋白质,其中呈递减下调表达的蛋白质73个,分别是参与精子能量代谢过程蛋白质、参与精子运动和细胞循环途径蛋白质、参与精子细胞免疫反应和凋亡途径蛋白质和其他蛋白质,其中部分蛋白与精子活力明显相关.结论:部分精子蛋白质表达下调可能是导致成人弱精症的重要原因之一.
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精索静脉曲张不育患者精子蛋白组双向电泳技术的建立与优化
目的:建立与优化精索静脉曲张不育患者精子蛋白质组双向凝胶电泳技术.方法:采取Percoll密度梯度离心法提取精索静脉曲张不育患者精子,比较不同精子蛋白样品制备方法、不同胶条、不同上样量和不同水化方式对双向凝胶电泳结果的影响.结果:使用clean-up kit法对样品进行预处理,选取pH 5～8的固相化pH梯度胶条,采用250 μg的上样量和主动水化方式能获得背景干净、分辨率高的双向电泳(Two-dimensional electrophoresis,2-DE)图谱.结论:成功建立了精索静脉曲张不育患者精子蛋白双向凝胶电泳平台,所获2-DE图谱的分辨率高、重复性好,为进一步探讨精索静脉曲张导致不育的分子机制奠定了技术基础.
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弱精不育与正常精子蛋白质的双向电泳研究
目的:检测人类正常精子与弱精不育精子的差异表达蛋白质.方法:用2-DE-IPG-DALT技术对36例弱精不育与10例正常精子总蛋白进行分离,银染后,切取2个在患者中不表达的差异蛋白质点进行质谱鉴定.结果:成功建立了弱精不育与正常精子总蛋白的双向电泳图谱,经图像分析显示,弱精不育精子中高丰度表达而正常样本中缺失或表达下调的27个蛋白点,正常精子中存在而在弱精不育精子中缺失或低表达的37个点.并对C35和C37这2个差异蛋白质进行了质谱鉴定.结论:差异蛋白与弱精不育相关.
