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毛细管电泳的新进展
毛细管电泳是近年发展快的分离分析技术之一.它具有高灵敏度、高分辨率、高速度等优点,广泛应用于各个领域.随着毛细管电泳技术的不断发展,逐渐出现了非水毛细管电泳,毛细管阵列电泳,毛细管电泳免疫分析,毛细管电色谱手性拆分等分支.
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CEIA-LIF法在重型再生障碍性贫血患者干扰素-γ水平检测中的应用
目的:检测再生障碍性贫血(再障)患者单个CD8+T细胞内干扰素-γ(IFN-γ)的绝对含量.方法:用毛细管电泳免疫分析激光诱导荧光法对再障患者外周血单个CD8+T细胞内IFN-γ的水平进行定量检测.结果:2例重型再障(SAA)患者免疫治疗前外周血单个CD8+T细胞内IFN-γ的水平分别为(151.53±28.92)z mol和(223.72±45.23)z mol,免疫治疗后相应的降为(45.57±13.90)z mo1和(36.44±9.66)z mol,正常对照为(47.47±17.97)z mol.经统计分析,SAA患者治疗前、后及与正常对照比较差异均有统计学意义.结论:毛细管电泳免疫分析激光诱导荧光法可以检测到外周血单个CD8+T细胞内IFN-γ的z mol水平,有望成为一种新的检测方法应用于临床.
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单个CD8+T细胞内IFN-γ含量的测定
目的: 建立一种新的单细胞内IFN-γ的检测方法毛细管电泳免疫分析激光诱导荧光法(CEIA-LIF).方法: 选2例重型再障(sever aplastic anemia, SAA)患者及1例正常人, 用免疫磁珠法分离纯化外周血CD8+ T细胞.将其与毛地黄皂苷反应15 min, 再与FITC-抗IFN-γ单抗(mAb)反应20 min.用CEIA-LIF法进行单个细胞的连续检测, 并用倒置显微镜及激光扫描共聚焦荧光显微镜等证实本法的可行性.结果: 纯化的CD8+ T细胞内的IFN-γ, 是在不溶膜的情况下得到全部检测.2例SAA患者外周血单个CD8+ T细胞内IFN-γ的含量, 分别为(151.53±28.92)zmol和(223.72±45.23)zmol, 高出正常对照(47.47±17.97)zmol约3～4倍(P<0.01).结论: CEIA-LIF法对单个CD8+ T细胞内IFN-γ含量的测定是可行的, 有望用于临床检测.
