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稳定表达乙型肝炎病毒X基因肝细胞株的构建
目的 构建稳定表达乙型肝炎病毒X基因(HBVx)的正常人肝细胞株.方法 用PCR法扩增含EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点的X基因序列,构建HBVx基因真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBVx,转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆并对其进行双酶切和测序鉴定;用脂质体转染法将HBVx基因导入Chang细胞系,G418筛选,RT-PCR和Western blot鉴定.结果 X基因亚克隆入pcDNA3.1(+),含有完整的X基因片段,转染后Chang细胞有HBVx mRNA表达,Chang/HBVx有HBVx蛋白的表达.结论 构建了稳定表达HBVx基因的肝细胞株Chang/HBVx.
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复方丹参片对阿尔茨海默病转基因细胞模型Tau蛋白表达的影响
目的：研究复方丹参片对阿尔茨海默病（Alzheimer disease，AD）转基因细胞模型微管相关蛋白（Tau蛋白）表达的影响。方法将SD大鼠随机分成复方丹参片0.5、1、2、4倍剂量组、空白对照组及多奈哌齐组，分别灌服相应药液，空白组给予等容积生理盐水，1次/日，连续7 d之后，取各组血清培养AD转基因细胞，于24、48、72 h采用Western Blot法分析AD转基因细胞Tau蛋白表达情况。结果与空白对照组相比，24 h时复方丹参片1、2、4倍剂量组能降低Tau蛋白表达，差异有统计学意义(P<0.01)；48 h时复方丹参片2、4倍剂量组差异有统计学意义(P<0.01)；72 h时各剂量组间差异均无统计学意义(P>0.05)。结论复方丹参片2倍剂量48 h时能显著减少AD转基因细胞模型Tau蛋白表达。
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复方丹参片对阿尔茨海默病转基因细胞模型AChE表达的影响
目的:研究复方丹参片对阿尔茨海默病(AD)转基因细胞模型乙酰胆碱酯酶(ACHE)表达的影响.方法:将SD大鼠60只随机分成复方丹参片0.5、1、2、4倍剂量组,空白对照组及多奈哌齐对照组.各组大鼠分别灌服相应浓度药液,空白对照组给予等容积生理盐水,每天1次,连续7天.末次给药后1h,取各组大鼠含药血清培养AD转基因细胞,于24、48、72 h采用Western Blot方法分析AD转基因细胞AChE的表达.结果:与空白对照组比较,24、48 h时2、4倍复方丹参片组AChE表达明显降低,差异有非常显著性意义(P＜0.01),72h时差异无显著性意义(P＞0.05);2、4倍复方丹参片组组内48 h与24 h比较,AChE表达降低,差异有非常显著性意义(P＜0.01).结论:复方丹参片能在一定程度上减少AD转基因细胞模型AChE的表达.
关键词： 复方丹参片 乙酰胆碱酯酶 阿尔茨海默病(AD) 转基因细胞模型
