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地西他滨对同步化的G0／G1期MDS-L细胞系线粒体功能的影响
目的：初步探讨地西他滨（ DAC）在不整合入基因组DNA的情况下对线粒体生物学功能的影响。方法采用阿非迪霉素（ APC）将MDS-L细胞同步化在G0/G1期。 DCFH-DA检测不同浓度DAC（0、5、10、15μmol/L）处理后的同步化G0/G1期细胞系活性氧（ ROS）的产生水平。采用qRT-PCR法检测线粒体DNA拷贝数和线粒体编码基因NADH脱氢酶1、6（ ND1、ND6） mRNA改变。结果与对照组相比，DAC在低浓度5μmol/L条件下可以通过不依赖DNA损伤的途径增加细胞ROS的产生（P＜0．05），同时细胞内线粒体DNA（MtDNA）的拷贝数较对照组明显增加，差异有统计学意义（P＜0．05）。但随着DAC浓度增加，DAC在高浓度（15μmol/L）可降低ROS的产生（P＜0．05）。此外，在高浓度DAC作用下，ND1和ND6基因表达较对照组明显升高（P＜0．05）。结论 DAC通过影响细胞ROS产生，改变线粒体DNA的拷贝数以及调控线粒体基因的表达，产生对线粒体功能的影响，并呈浓度依赖性。
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过氧化氢对人牙周膜细胞增殖及成骨分化的影响
目的:研究低浓度的H2 O2对人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,hPDLCs)增殖及成骨分化的影响.方法:采用组织块法培养hPDLCs,免疫细胞化学染色鉴定其来源;采用不同浓度的H2O2处理hPDLCs,CCK-8法检测细胞的增殖活性;并对处理后的hPDLCs进行成骨诱导,碱性磷酸酶检测试剂盒测定细胞的碱性磷酸酶(ALP)活性,茜素红染色法(ARS)观察细胞矿化结节的形成情况.结果:采用组织块法成功培养出hPDLCs,细胞抗波形丝蛋白染色阳性,抗角蛋白染色阴性;CCK-8结果显示:低浓度的H2 O2(20～300μM)可提高hPDLCs的增殖活性,更低浓度(0～10μM)和较高浓度(500μM)对细胞增殖活性无影响,而更高浓度(700μM)则抑制细胞的增殖活性;ALP活性及ARS染色半定量结果分析显示:适当浓度范围的H2O2(10～80μM)可提高细胞ALP活性及增加矿化结节形成量,而当浓度上升至100～300 mM时,细胞的ALP活性降低,矿化结节形成量减少.结论:H2O2对hPDLCs的增殖及分化的影响存在剂量效应,一定低浓度范围的H2O2可提高hPDLCs的增殖活性并促进其成骨分化.
