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低密度接种传代文献资料
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接种密度对大鼠髓核间充质干细胞的影响
[目的]比较不同细胞接种密度传代培养大鼠髓核间充质干细胞(nucleus pulposus-derived mesenchymal stem cells,NPMSCs)对NPMSCs的形态及表面标志物的影响.[方法]取12周龄SD大鼠椎间盘髓核组织体外消化获得原代细胞,待达到60％～70％融合时消化,并按接种密度分为三组,分别为低密度组(5个细胞/cm2)、中密度组(100个细胞/cm2、正常密度组(10 000个细胞/cm2).培养至达到传代条件后,各组细胞均按10 000个细胞/cm2在体外进行传代接种,进行形态学观察并检测干细胞的特征性表面标志(CD29、CD34、CD44、CD45、CD90)的表达情况.[结果]在细胞形态学方面,各接种密度组细胞均可呈旋涡状贴壁生长,但低密废组以集落样生长,细胞多呈长梭形,形态一致;中密度组和高密度组细胞中类圆形、多边形细胞增多,大量细胞出现形态不规则、细胞宽大扁平、折光性差.在细胞表面标志物方面,低密度组CD44、CD90的表达率明显高于中密度组和高密度组(P＜0.05),而CD29、CD34、CD45差异无统计学意义(P＞0.05).[结论]低密度接种法可提高大鼠NPMSCs CD44及CD90的阳性率,纯化NPMSCs.
