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  • 内毒素对气管上皮细胞损伤的实验研究

    作者:陈艳;李育;王明艳;范欣生

    目的 脱察不同浓度内毒素(LPS)作用不同时程对气管上皮细胞(HBE)的损伤作用.方法 取处于对数生长期的HBE,加入LPS的终浓度分别为0.02 μg/ml、0.04 μg/ml、0.06 μg/ml、0.08 μg/ml、0.1 μg/ml、0.2 μg/ml、0.4 μg/ml、0.6 μg/ml、0.8 μg/ml、1.0 μg/ml,在培养箱内分别孵育24 h、48 h后,采用MTT比色法于酶联免疫测定仪490 nm波长处测定OD值.结果 作用24 h后,各浓度LPS对HBE具有不同程度的损伤作用,其中以0.1 μg/ml作用为明显(0.4080±0.0217 vs 0.3800±0.0100,P<0.01);作用48 h后,符浓度LPS对HBE具有不同程度的损伤作用,其中以0.1 μg/ml作用为明显(0.3900±0.0122 vs 0.3060±0.0230,P<0.01).结论 根据LPS致气管上皮细胞损伤的量效及时效关系,选择0.1 μg/ml作用24 h作为细胞刺激条件较为适宜.

  • 苯酚-硫酸法改用酶联免疫测定仪快速测定多糖组分

    作者:

    0 引言苯酚-硫酸法测定单糖和多糖的方法[1]及其改良方法[2]已成为多糖研究中必不可少的手段. 多糖分离纯化中常利用液相色谱法分离纯化多糖样品,逐管收集各分部流出液(一般要收集数十管至数百管),经苯酚-硫酸法衍生后,用分光光度计比色测定. 由于后者每批一般多只能测定三、四个样品,费事费时、损失样品较多等缺点,我们参考改良苯酚- 硫酸法,改用酶联免疫测定仪进行比色测定,建立了快速测定多糖组分的方法. 测定多糖组分的同时,采用Serva blue G染料结合法[3]还可快速测定多糖组分中的蛋白质.

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