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  • 钙离子调节亲环素配体及其不同剪接体的克隆及生物信息学分析

    作者:程勇前;成军;刘妍;王琳;徐东平;钟彦伟;曲建慧;赵平

    目的:克隆钙离子调节亲环素配体(CAML)及其不同剪接体,并应用生物信息学进行分析. 方法:以Jurkat、HepG2细胞提取的cDNA为模板,PCR扩增CAML基因,选用pGEM-T-easy载体进行TA克隆,利用VectorNT19.0软件与CAML基因所在染色体进行比对分析,并对CAML全长基因进行生物信息学分析. 结果:CAML基因克隆成功.并证实CAML基因在细胞中存在3种剪接体,分别为缺失全长CAML cDNA序列中634~698、173~633和173~698 bp的CAML序列.大小分别为825、429和363 bp.这些剪接体的组成中均包含了CAML与其他蛋白相互结合的亲水的N末端,以及CAML发挥调节钙离子内流作用所必需的第2,3跨膜结构域,说明这些剪接体均具有发挥CAML基本功能的可能. 结论:成功克隆了CAML基因,并首次证实CAML基因在细胞中存在不同剪接体.

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