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鬼臼乙叉甙对SHG-44胶质瘤细胞表达β-1,4-半乳糖基转移酶V后粘附相关分子表达的影响
目的研究人脑星形胶质细胞瘤SHG-44细胞表达(β-1,4-半乳糖基转移酶V(beta-1,4-galactosyltransferase V,β-1,4-GalT V)后对化疗药物敏感性的影响,分析鬼臼乙叉甙(VP16)处理表达β-1,4-半乳糖基转移酶V的SHG-44细胞后其细胞粘附作用相关因子水平的变化.方法用120 μmol/L的VP16处理转染了正义、反义β-1,4-GalT V和空载体的SHG-44细胞24h后,采用western blot检测整合蛋白β1表达变化及局部粘着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)的蛋白水平和FAK的酪氨酸磷酸化水平.结果在未经VP16处理的3株SHG-44细胞中,FAK的蛋白水平没有明显改变,而整合蛋白β1的蛋白表达在转正义β-1,4-GalT V的细胞中高;经VP16处理后,SHG-44细胞中整合蛋白β1的表达水平增高,FAK及其磷酸化水平下降.但整合蛋白β1,FAK及其磷酸化水平随细胞中β-1,4-GalT V表达水平不同而变化.结论VP16处理对表达不同水平的β-1,4-GalT V的SHG-44胶质瘤细胞的粘附影响有所不同,提示胶质瘤表达β-1,4-GalT V不仅与肿瘤的恶性行为有关,而且与肿瘤的化疗敏感性有关.
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正义和反义β1,4-半乳糖基转移酶V表达质粒在星形胶质细胞瘤细胞中的表达与鉴定
目的 构建β1,4-半乳糖基转移酶V(β1,4-galactosyltransferase V, β-1,4-GalT-V)正、反义表达质粒,为探讨神经胶质瘤细胞表达β-1,4-GalT-V的生物学意义提供研究基础.方法 构建β-1,4-GalT-V表达质粒,并将其转染到人脑星形胶质细胞瘤细胞SHG-44中;用Western blot和Northern blot鉴定转染后基因表达情况.结果 通过酶切鉴定和测序分析证实,成功构建了β-1,4-GalT-V表达质粒.将构建的表达质粒转染到胶质细胞瘤细胞SHG-44中,正义表达质粒能增加胶质细胞瘤细胞SHG-44中的β-1,4-GalT-V表达量,而转染反义质粒则能降低细胞中β-1,4-GalT-V表达量.结论 正、反义β-1,4-GalT-V表达质粒在人脑星形胶质细胞瘤细胞SHG-44中的稳定转染和表达,对分析胶质瘤细胞表达β-1,4-GalT-V的意义以及对肿瘤细胞的增殖、迁移和黏附等的影响,提供了研究基础.
关键词： β1 4-半乳糖基转移酶V 星形胶质细胞瘤 SHG-44细胞 表达质粒 -
β-1,4-半乳糖基转移酶V对星形胶质细胞起源肿瘤细胞恶性行为影响的初步研究
背景与目的:在恶性转化的肿瘤细胞中有β-1,4-半乳糖基转移酶V(beta-1,4-galactosyltrans-ferase V,β-1,4-GalT V)基因的高表达.我们在以往的研究中发现:随着人脑星形胶质起源肿瘤恶性程度的增高,β-1,4-GalT V的基因表达也相应增高.为研究β-1,4-GalT V与人脑星形胶质细胞起源肿瘤恶性行为的关系,本研究检测β-1,4-GalT V对星形胶质细胞起源肿瘤细胞株SHG-44的迁移和增殖能力的影响.方法:采用划痕试验的方法,将转染了β-1,4-GalT V正义、反义和空载体的SHG-44细胞株接种于包被有纤连蛋白或层连蛋白的板上,观察划痕后不同时间向划痕处生长不同距离的细胞数.同时采用MTT法分析SHG-44细胞转染不同质粒后对细胞增殖的影响.结果:与转染空载体的SHG-44细胞株相比,转染正义β-1,4-GalTV的SHG-44细胞迁移和增殖速度均加快,而转染反义β-1,4-GalT V的SHG-44细胞迁移和增殖速度均减慢.结论:β-1,4-GalT V对SHG-44细胞的迁移和增殖能力均有影响,提示β-1,4-GalT V可能与SHG-44细胞的恶性生物学行为有关.
关键词： 星型胶质瘤细胞 β-1 4-半乳糖基转移酶V 迁移 增殖
