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多重PCR方法检测多耐药鲍曼不动杆菌基因型
目的 建立一种适于临床微生物实验室快速检测多耐药鲍曼不动杆菌基因的多重PCR方法 .方法 筛选临床分离鉴定的多耐药鲍曼不动杆菌105株;用热煮沸法提取DNA,采用多重PCR技术,优化反应条件,同时扩增OXA酶基因(blaOXA-23-likeblaOXA-24-likeblaOXA-51-likeblaOXA-58-like)和整合酶基因(intI 1,intI 2),扩增产物经凝胶成像系统分析.结果 105株多耐药鲍曼不动杆菌中,76株是blaOXA-51-like+blaOXA-23-like+intI 1基因型,18株是blaOXA-51-like+intI 1基因型,10株是blaOXA-51-like+blaOXA-23-like.基因型,1株是blaOXA-51-like+blaOXA-23-like+blaOXA-58-like基因型.未检测出携带有blaOXA-24-like和intI 2基因的菌株.结论多耐药鲍曼不动杆菌的耐药性及流行趋势与其携带的OXA酶基因和整合酶基因相关.
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碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌OXA酶基因研究
目的 检测临床分离鲍曼不动杆菌的耐药性及OXA酶基因型,研究blaOXA-23突变对耐药性的影响.方法 琼脂稀释法检测50株鲍曼不动杆菌对抗菌药物的低抑菌浓度(MIC),聚合酶链反应(PCR)检测鲍曼不动杆菌4种OXA型碳青霉烯酶基因,TA克隆耐药基因全序列后测序检测blaOXA-23的突变.结果 本地区鲍曼不动杆菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别达到80％和78％,仅对头孢哌酮/舒巴坦、多黏菌素B、米诺环素、替加环素有较高的敏感性.blaOXA-51和blaOXA-23检出率分别是(100％)和80％(40/50),blaOXA-24和blaOXA-58基因均未检测到.9株blaOXA-23测序,发现7株序列与GenBank登录号为NC017171的序列100％一致;另2株(WY-1017和WY-0713) blaOXA-23分别有一个(T47C)和两个(A336G、T392C)碱基位点的突变,为blaOXA-23新亚型,分别命名为blaOXA-422和blaOXA-423,其中blaOXA-423的突变(T392C)导致编码产物关键性氨基酸位点的改变,影响鲍曼不动杆菌的耐药性.结论 本地区鲍曼不动杆菌耐药形势严峻,鲍曼不动杆菌耐碳青霉烯类抗生素与携带blaOXA-23有关;发现新的blaOXA-23亚型blaOXA-422和blaOXA-423和blaOXA-23突变能够影响鲍曼不动杆菌的耐药性.
