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PKGⅡ对胃癌SGC-7901细胞增殖相关的MAPK/ERK下游信号分子的抑制作用
目的:探讨cGMP依赖性蛋白激酶Ⅱ(cGMP-dependent protein kinase Ⅱ,PKG Ⅱ)对人胃癌SGC-7901细胞增殖相关的丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)/细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)下游核糖体S6激酶1(ribosomal S6 kinase 1,RSK1)和原癌基因c-Jun、c-Fos的作用.方法:用腺病毒Ad-LacZ和Ad-PKG Ⅱ感染SGC-7901细胞,使细胞高表达PKG Ⅱ;用特异性PKG Ⅱ激活剂8-pCPT-cGMP[8-(p-chlorophenylthio)-cyclic GMP]作用于感染了腺病毒的细胞,再用表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)进行刺激.MTT法检测PKG Ⅱ对EGF刺激引起的SGC-7901细胞增殖的影响,RT-PCR法和蛋白质印迹法分别检测PKG Ⅱ对EGF引起的SGC-7901细胞中c-Jun、c-Fos mRNA和p-RSK1、c-Jun、c-Fos蛋白表达的影响,免疫荧光显微镜下观察p-RSK1在SGC-7901细胞核内的分布情况.结果:8-pCPT-cGMP作用于感染了Ad-PKG Ⅱ的SGC-7901细胞后,EGF对SGC-7901细胞的增殖促进作用和EGF诱导的c-Jun、c-Fos mRNA和蛋白的表达受到抑制,RSK1 (Ser380)磷酸化水平明显降低；EGF刺激后,SGC-7901细胞核内大量累积p-RSK1,8-pCPT-cGMP作用后细胞核内p-RSK1减少.结论:激活的PKG Ⅱ可有效抑制EGF诱导的胃癌细胞的增殖、RSK1 Ser380位点的磷酸化、p-RSK1在细胞核内的累积以及原癌基因c-Jun和c-Fos的表达.
