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下调SPOCK1基因表达可抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭
目的:检测膀胱癌细胞中SPOCK1(sparc/osteonectin,cwcv and kazal-like domains proteoglycan 1)基因的表达情况,并进一步研究下调SPOCK1基因表达对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法:采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测人输尿管上皮永生化细胞SV-HUC-1以及膀胱癌细胞株5637和T24中SPOCK1基因的表达情况.构建特异性针对SPOCK1基因的siRNA片段,并将其通过脂质体介导转染至膀胱癌5637细胞;同时设立未转染的空白对照组和转染无义序列的阴性对照组.采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测各组细胞中SPOCK1 mRNA和蛋白的表达差异.然后采用CCK-8法、划痕愈合实验和Transwel1小室法分别检测SPOCK1基因表达下调后膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化情况.结果:膀胱癌细胞中SPOCK1基因表达水平高于输尿管上皮永生化细胞,尤以膀胱癌5637细胞中的表达水平高(P值均＜ 0.05).SPOCK1 siRNA转染后,膀胱癌5637细胞中SPOCK1基因的表达明显下调(P＜0.05),而膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力均被明显抑制(P值均＜ 0.05).结论:膀胱癌细胞中SPOCK1基因存在过表达现象.下调SPOCK1基因表达可以降低膀胱癌5637细胞的增殖、迁移和侵袭能力.
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SPOCK1通过mTOR-s6 K信号通路诱导肺癌细胞增殖、侵袭和迁移
目的:探讨SPOCK1在肺癌组织的表达及对肺癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响.方法:肺癌细胞株A549、H3255按照转染类型分为RNA干扰组和对照组(NC组),采用小干扰RNA(siRNA)技术抑制肺癌A549、H3255细胞SPOCK1的表达,MTT增殖实验检测细胞增殖能力,集落形成实验检测细胞集落形成能力,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力,RT-PCR和Western blotting检测mTOR-s6K信号通路相关mRNA和蛋白的表达水平.结果:在肺癌A549、H3255细胞中,siSPOCK1组细胞增殖率、集落形成数、侵袭细胞数、划痕愈合率明显低于NC组(P<0.05).在SPOCK1敲除的A549细胞中,siSPOCK1组和NC组G0/G1期细胞数分别为66.5％和54.3％,两组间比较差异具有统计学意义(P<0.05);在H3255细胞中,siSPOCK1组和NC组G0/G1期细胞数分别为70.2％和55.7％,两组间比较差异具有统计学意义(P<0.05).A549、H3255细胞中,与NC组比较,siSPOCK1组mTOR、s6K mRNA表达水平明显下降,组间比较差异具有统计学意义(P<0.05);siSPOCK1组p-mTOR、p-s6K蛋白相对表达水平明显低于NC组,两组间比较差异有统计学意义(P<0.05).结论:降低SPOCK1表达能够抑制肺癌细胞增殖、侵袭和迁移能力,其作用机制可能与mTOR-s6 K信号通路有关.
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SPOCK1基因与恶性肿瘤关系的研究进展
恶性肿瘤危害着人类身体健康,恶性肿瘤相关基因一直是研究的热点.SPOCK1 (Sparc/osteonectin cwcv and kazal-like domains proteoglycan 1)基因是新发现位于人染色体5q31的致癌基因.在临床研究表明,神经胶质瘤、肝癌、结肠癌等肿瘤组织中SPOCK1的表达水平与肿瘤的转移、复发以及患者预后密切相关.文中主要介绍了SPOCK1在肿瘤中作用机制的新研究进展,然而SPOCK1成为诊断标志物或基因治疗靶点仍然需要进一步大规模的基础和临床研究.
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膀胱癌病灶内癌基因DKK2、SPOCK1表达量的变化及其与癌细胞增殖、侵袭的相关性
目的:研究膀胱癌病灶内癌基因Dickkopf2(DKK2)、sparc/osteonectin,cw cv and kazal-like domains proteoglycan 1(SPOCK1)表达量的变化及其与癌细胞增殖、侵袭的相关性.方法:收集我院手术切除的膀胱癌病灶及癌旁病灶,采用试剂盒测定DKK2 、SPOCK1及增殖基因、侵袭基因的mRNA表达量.结果:膀胱癌病灶内DKK2 、细胞增殖抑制基因(HSG ) 、p16 、细胞粘附分子-1 (CADM 1 ) 、金属蛋白酶组织抑制剂2(TIMP2)、TIMP4的mRNA表达量明显低于癌旁病灶,SPOCK1、β-连环蛋白(β-catenin)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、c-myc、波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶2(MMP2)的mRNA表达量明显高于癌旁病灶;DKK2与β-catenin、CyclinD1、c-myc、Vimentin、MMP2呈负相关,与HSG、p16、CADM1、TIMP2、TIMP4呈正相关;SPOCK1与β-catenin、CyclinD1、c-myc、Vimentin、MMP2呈正相关,与HSG、p16、CADM1、TIMP2、TIMP4呈负相关.结论:膀胱癌病灶内癌基因DKK2的低表达、SPOCK1的高表达与增殖、侵袭基因的变化有关,可能参与病灶的生长.
