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MicroRNA-21调控乳腺癌对吉西他滨耐药的机制
背景与目的：以吉西他滨为基础的联合用药在转移性乳腺癌中展示出很好的临床疗效和安全性，但耐药的出现导致治疗失败。MicroRNA是一类非编码小分子RNA，起到类似癌基因或抑癌基因的作用。虽然肿瘤中关于化疗药物耐药的机制报道很多，但microRNA异常表达与耐药之间的关系及机制还不十分清楚。本研究旨在探讨microRNA-21在乳腺癌吉西他滨耐药中的作用及其可能机制。方法：采用低浓度持续诱导MDA-MB-231细胞的方式构建人乳腺癌耐吉西他滨细胞株，药物敏感性差异达10倍以上，继而通过实时荧光定量PCR(real-time PCR，RT-PCR)、CCK-8、蛋白[质]印迹法(Western blot)、转染、划痕和Transwell等实验分别检测microRNA-21对药物的敏感性及上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition，EMT)标志物的影响。结果：在乳腺癌吉西他滨耐药细胞株中存在EMT现象，相比亲代细胞，microRNA-21呈高表达，并与吉西他滨敏感性呈负相关。转染microRNA-21的抑制剂和mimic可以分别下调和上调microRNA-21表达，同时EMT现象和药物敏感性也发生了相应的变化。结论：MicroRNA-21可能通过诱导肿瘤细胞的EMT发生而介导乳腺癌对吉西他滨的耐药。
关键词： MicroRNA-21 乳腺癌 吉西他滨耐药 上皮-间充质转化 -
吉西他滨耐药的胰腺癌SW1990细胞株的建立及相关特性检测
目的：探讨对吉西他滨( GEM )耐药的胰腺癌SW1990细胞诱导方法,以期进一步认识胰腺癌耐药的发生机制,并对诱导的GEM耐药的胰腺癌细胞与其亲本细胞的生物学特性进行比较。方法采用逐步浓度递增法诱导对GEM耐药的细胞株 SW1990-GZ。 MTT 法检测 SW1990和SW1990-GZ 的半数致死量(IC50)、耐药系数(R),并观察其生长差异。采用高效液相色谱法( HPLC)检测不同时间点SW1990和 SW1990-GZ 对 GEM 药物的摄取情况。结果SW1990和SW1990-GZ的IC50为(0．07±0．0021)、(87．50±3．2400)μg/ml,R=1250；在不同浓度GEM作用下,诱导后耐药的SW1990-GZ对GEM的敏感性明显降低。细胞生长曲线显示耐药细胞 SW1990-GZ相对于 SW1990生长缓慢。不同时间点GEM孵育后,SW1990-GZ细胞对GEM药物的摄取较SW1990细胞降低。结论成功诱导了耐GEM药物的SW1990-GZ细胞株,耐药性能稳定、明显。 SW1990-GZ细胞可能存在着一定的机制使得细胞摄取GEM降低。
