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肿瘤生长因子β1及血小板衍生生长因子对肝窦内皮细胞整合素α631及黏着斑激酶表达的影响
目的观察肿瘤生长因子β1(TGFβ1)及血小板衍生生长因子(PDGF)对大鼠肝窦内皮细胞(sinusoidal endothelial cell,SEC)整合素α6β1表达及黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)活性的影响.方法用胶原酶原位灌注、Percoll不连续密度梯度离心法分离大鼠SEC,并进行体外培养.采用细胞-ELISA和免疫沉淀蛋白质酪氨酸激酶活性测定法,分别观察TGFβ1及PDGF对SEC表面整合素α6β1表达及FAK活性的影响.结果经TGFβ1及PDGF作用24 h后,α6β1蛋白表达明显强于对照组(P＜0.05),且呈剂量依赖性.作用至48 h,表达继续增强,细胞中FAK的活性也明显增高(P＜0.05),虽于48 h后回落,但仍明显高于对照组.结论 TGFβ1及PDGF可促进SEC表面整合素α6β1的表达及FAK活性增高,可能是它们参与肝纤维化发生的机制之一.
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TGF-β1在胃癌中表达及意义
目的研究TGF-β1在胃癌中表达,并评价其临床病理价值.方法采用免疫组化S-P法研究,20例正常胃黏膜,46例胃癌中TGF- β1表达.结果胃癌组TGF-β1阳性率100%,正常胃黏膜组为5%,TGF-β1在胃癌淋巴结转移组表达高于淋巴结无转移组.结论 TGF-β1在胃癌进展中起重要作用.
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miRNA-203联合TSGF、CEA检测在胃癌诊断中的应用
目的 分析微小核糖核酸-203(miRNA-203)联合肿瘤生长因子(TSGF)、癌胚抗原(CEA)检测在胃癌诊断中的应用.方法 选择2015年7月至2016年7月来该院就诊的40例胃癌患者为观察组,选择同期30例健康志愿者为对照组,分析研究对象的外周血清CEA、miRNA-203、TSGF 水平.结果 观察组患者miRNA-203相对表达量为(0.26 ± 0.16)U/mL,明显低于对照组的(0.84 ± 0.09)U/mL(P<0.05);观察组TSGF、CEA表达水平及阳性率明显高于对照组(P<0.05).miRNA-203相对表达量随分期递增而减少(F=5.60,P=0.0075).TSGF、CEA表达水平随分期递增而增加(P<0.05);不同分期CEA阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05),而不同分期TSGF阳性率差异无统计学意义(P>0.05).miRNA-203联合 TSGF、CEA检测的敏感度为95.00%,明显高于单项检测或者2项指标联合检测结果,差异有统计学意义(P< 0.05).miRNA-203联合TSGF、CEA检测的诊断符合率为97.50%,特异度为90.00%,优于单项或者两项联合结果(P<0.05).结论 采用miRNA-203联合TSGF、CEA检测,可以及时准确诊断胃癌,具有较高的特异度与诊断符合率,在临床上有较高的诊断价值.
关键词： 微小核糖核酸-203 肿瘤生长因子 癌胚抗原 胃癌 -
TGF-β1基因转染BM-MSC对肝癌转移潜能影响的实验研究
目的 观察经TGF-β1基因修饰的人骨髓间充质干细胞(hMSC)对高转移潜能肝癌细胞(MHCC97-H)增殖能力及侵袭能力的影响.方法 ①利用Gateway Technology法构建TGF-β1慢病毒载体,eGFP为报告基因,转染hMSC,病毒滴度测定转染率;②Transwell法检测hMSC与肝癌细胞共培养实验,下室加入500μl含20％FBS的培养基和1×104个基因修饰前后hMSC,上室加入100μl浓度为1×106个/ml的人高转移肝癌细胞(MHCC97-H)悬液,小室置于37℃,5％CO2培养箱内培养48 h,结晶紫染色,细胞计数,检测MHCC97-H细胞侵袭能力的变化;③CCK-8法检测与hMSC共培养前后MHCC97-H增殖能力的变化;④PCR法检测转基因hMSC与MHCC97-H细胞共培养前后转移相关因子基因α-V,肿瘤生长因子TGF-β1和肿瘤凋亡因子PDCD4等基因表达.结果 (1)hMSC TGF-β1过表达组细胞的转导率达90％以上.(2) MHCC97-H细胞增殖能力检测结果:①MHCC97-H与hMSC细胞共培养后,MHCC97-H增殖能力增强;②hMSC TGF-β1基因过表达组对MHCC97-H细胞增殖具有抑制作用.(3)MHCC97-H细胞侵袭能力检测结果:①MHCC97-H与hMSC细胞共培养后,侵袭能力增强;②hMSC TGF-β1基因过表达组对MHCC97-H细胞侵袭能力具有明显的抑制作用.(4) Q-PCR检测结果:①hMSC基因转染组TGF-β1表达明显增高;②hMSC基因转染共培养组MHCC97-H细胞TGF-β1基因表达明显低于对照组;③hMSC基因转染共培养组MHCC97-H细胞α5基因表达降低;④hMSC基因转染共培养组MHCC97-H细胞PDCD4基因表达降低.结论 TGF-β1基因hMSC过表达组细胞MHCC97-H细胞的转导率达90％以上;转基因hMSC具有抑制MHCC97-H细胞增殖和细胞侵袭的作用.
关键词： 髓间充质干细胞 高转移潜能肝癌细胞 肿瘤生长因子 细胞程序化凋亡因子4 整合素
