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染料介导光氧化处理去细胞牛颈静脉带瓣管道的细胞毒性研究
目的:评价染料亚甲基蓝介导的光氧化处理去细胞牛颈静脉带瓣管道的细胞毒性.方法:(1)间接接触毒性试验:制备染料介导光氧化处理去细胞牛颈静脉带瓣管道浸提液,培养L929细胞,然后采用MTT比色法测定相对增殖率.(2)直接接触毒性试验:将L929细胞与染料介导光氧化处理去细胞牛颈静脉带瓣管道直接接触培养,在不同时间观察细胞的生长状态.将L929细胞种植于染料介导光氧化处理去细胞牛颈静脉带瓣管道表面,用扫描电镜观察其生长情况.结果:染料亚甲基蓝介导光氧化处理去细胞牛颈静脉带瓣管道的性质稳定,细胞毒性程度为0～1级.L929细胞与瓣膜材料直接接触培养生长良好,形态学无明显改变.结论:染料介导光氧化处理去细胞牛颈静脉带瓣管道的细胞相容性良好.
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染料介导光氧化法处理的同种异体动脉体内近期抗钙化性能评价
目的 观察染料介导光氧化法(DMP)处理的家兔胸主动脉用于同种异体腹主动脉置换后,在体内血流环境下的抗钙化性能.方法 以经染料介导光氧化反应处理的家兔胸主动脉为研究对象,以戊二醛(GA)处理的家兔胸主动脉以及自体腹主动脉原位移植(OT)作为对照,建立家兔胸-腹主动脉移植模型;实验动物观察饲养1个月后,取出标本,通过原子吸收光谱法测定血管组织钙含量,扫描电镜观察血管壁钙化情况.结果 DMP组血管壁钙含量为(3.58±0.22)μg/mg,GA组血管壁钙含量为(22.5±0.53)μg/mg,自体动脉移植组组织钙含量(2.99±0.33)μg/mg,DMP组组织钙含量虽较OT组高,但差异无统计学意义(P》0.05),DMP组组织钙含量较GA组低(P《0.01);扫描电镜下观察可见,GA组有大量的钙沉积,DMP组仅见少量钙沉积.结论 光氧化反应处理的家兔胸主动脉在家兔胸-腹主动脉移植的动物模型中,抗钙化性能优于戊二醛固定的胸主动脉.
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染料介导光氧化法处理的同种异体动脉体内近期生物稳定性和细胞毒性研究
观察染料介导光氧化(DMP)法处理的家兔胸主动脉用于同种异体腹主动脉置换后,在体内血流环境下的生物稳定性和细胞毒性.以经染料介导的光氧化反应处理的家兔胸主动脉为研究对象,以戊二醛(GA)处理的家兔胸主动脉以及自体腹主动脉原位移植作为对照,建立家兔胸-腹主动脉移植模型;实验动物观察饲养1个月后,取出标本观察,通过光学显微镜半定量计数观察移植血管的体内生物稳定性;通过扫描电镜半定量计数观察移植血管内皮覆盖情况,以此评价移植血管的细胞毒性.结果显示:DMP组生物稳定性指数较自体动脉移植组低,差异不具统计学意义(P＞0.05),DMP组生物稳定性指数较GA组高,差异具显著统计学意义(P＜0.01);DMP组内皮覆盖率较GA组高,差异具显著统计学意义(P＜0.01).表明:光氧化反应处理的家兔胸主动脉在家兔胸-腹主动脉移植的动物模型中,生物稳定性高,细胞毒性低.
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染料介导光氧化固定牛带瓣颈静脉的生物特性评价
为了解染料介导光氧化固定牛颈静脉的生物稳定性,抗钙化性和免疫原性,新鲜的牛颈带瓣静脉经染料介导光氧化法固定,分别进行化学消化和胃蛋白酶消化,上清液进行梯度聚丙烯酰胺电泳来了解其生物稳定性;将氧化固定的材料埋植于SD大鼠皮下,3周后取出,测钙含量、进行钙染色以及组织学检查了解其抗钙化性和免疫原性;采用戊二醛固定以及新鲜的牛带瓣颈静脉作为对照.染料介导光氧化固定的牛带瓣颈静脉经化学和酶消化之后的上清液电泳之后出现极淡的蛋白条带,明显淡于新鲜的未处理的材料,戊二醛固定的材料几乎不出现蛋白条带. 皮下埋植3周后,钙含量测定,染料介导光氧化组显著低于戊二醛组,统计学上差异有显著性意义;钙染色,戊二醛组可见大量的钙沉积,新鲜组也可见钙沉积,但比戊二醛组少,染料介导光氧化组只见少量钙沉积;组织学检查提示光氧化组细胞浸润明显少于其他两组.体外动物实验提示,染料介导光氧化固定的牛带瓣颈静脉具有生物稳定性,低的钙化性和低免疫原性.
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染料介导光氧化处理去细胞猪主动脉瓣的生物学特性
目的 探讨染料介导光氧化处理猪主动脉瓣膜的生物学特性,以期获得性能良好的新型生物瓣膜材料.方法 经去细胞处理的猪主动脉瓣30个,随机分为3组.光氧化处理组(n=10):去细胞瓣膜经染料介导光氧化处理;戊二醛处理组(n=10):去细胞瓣膜采用戊二醛处理;去细胞对照组(n=10):去细胞瓣不做固定处理,置于生理盐水中备用.分别测定并比较3组瓣膜的形态学改变、组织学特点、瓣膜厚度、含水量、热皱缩温度、断裂强度和可溶性蛋白含量.结果 光氧化处理组主动脉瓣呈淡蓝色,瓣膜质地柔软,弹性大,瓣叶无皱缩.光氧化处理组主动脉瓣瓣膜厚度较戊二醛处理组薄(0.26±0.09 mm vs.0.38±0.08 mm;P＜0.05),组织含水量较戊二醛处理组大(86.30%±4.03% vs.71.10%±3.23%;P＜0.05),热皱缩温度低于戊二醛处理组(76.30±0.70℃ vs.87.70±0.30℃;P＜0.05);瓣膜厚度、组织含水量和热皱缩温度与去细胞对照组比较差异无统计学意义.光氧化处理组断裂强度较去细胞对照组明显增大(17.33±2.65 mPa vs.9.11±0.95 mPa, P＜0.05),可溶性蛋白含量较去细胞对照组明显减少(0.039%±0.013% vs.0.107%±0.024%;P＜0.05),而与戊二醛处理组比较差异无统计学意义.结论 染料介导光氧化处理去细胞猪主动脉瓣有较好的生物学特性.
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染料介导光氧化处理去细胞牛颈静脉带瓣管道的生物学特性
目的 评价染料介导光氧化处理去细胞牛颈静脉带瓣管道的生物学特性.方法 2009年7月至2010年7月,第四军医大学西京医院采用不同方法处理牛颈静脉带瓣管道,选用年龄2～6岁、体重200～400 kg秦川黄牛的牛颈静脉带瓣管道40根,按随机数字表法分为4组,每组10根.戊二醛处理组(GA组):用戊二醛处理牛颈静脉带瓣管道;去细胞处理组(DC组):将牛颈静脉带瓣管道进行去细胞处理;去细胞+染料介导光氧化联合处理组(DP组):将牛颈静脉带瓣管道进行去细胞+染料介导光氧化联合处理;对照组(CO组):不作固定处理.比较4组牛颈静脉带瓣管道管壁的大体形态、组织学特点、瓣膜厚度、组织含水量、热皱缩温度和断裂强度,并测定可溶性蛋白含量.结果 DP组牛颈静脉带瓣管道的管壁和瓣膜厚度、组织含水量与CO组比较差异均无统计学意义(P＞0.05),但管壁和瓣膜厚度均小于GA组(管壁:0.8±0.1 mm vs.1.1±0.1 mm,瓣膜:0.2±0.1 mm vs.0.3±0.1 mm,P＜0.05),管壁和瓣膜组织含水量均大于GA组(管壁:86.1%±2.2%vs.70.4%±2.8%,瓣膜:87.1%±2.5%vs.72.1%±3.1%,P＜0.05);DP组管壁和瓣膜热皱缩温度、断裂强度与GA组比较差异无统计学意义(P＞0.05),但管壁和瓣膜热皱缩温度(管壁:84.7±1.4℃vs.70.4±0.3℃,P＜0.05;瓣膜:85.7±1.5℃vs.70.7±0.6℃,P＜0.05)和断裂强度(管壁:10.4±1.1 N vs.6.8±1.0 N,P＜0.05;瓣膜:8.0±0.9 N vs.3.2±0.6 N,P＜0.05)大于CO组.结论 去细胞+染料介导光氧化联合处理牛颈静脉带瓣管道具有较好的生物学特性.
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染料介导的光氧化处理去细胞猪主动脉瓣的细胞毒性研究
目的 评价染料亚甲基蓝介导的光氧化处理去细胞猪主动脉瓣膜的细胞毒性.方法 将L929细胞经亚甲基蓝介导光氧化处理去细胞猪主动脉瓣浸提液培养后,用MTT比色法测定其相对增殖率.将L929细胞与染料介导光氧化处理去细胞猪主动脉瓣直接接触培养,于不同时间观察细胞的生长状态.将L929细胞种植于染料介导的光氧化处理去细胞猪主动脉瓣表面,用扫描电镜观察其生长情况.结果 染料亚甲基蓝介导的光氧化处理去细胞猪主动脉瓣的性质稳定,细胞毒性程度为0～Ⅰ级.L929细胞与瓣膜材料直接接触培养生长良好,形态学无明显改变.结论 染料亚甲基蓝介导的光氧化处理去细胞猪主动脉瓣的细胞相容性良好.
