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口服基因疫苗预防柯萨奇B组病毒性心肌炎的实验研究
为研制防治病毒性心肌炎的口服基因疫苗,本文以减毒鼠伤寒杆菌SL7207作载体,将表达CVB3VPI基因的pcDNA3VP1重组质粒转化入该细菌中,制备成口服基因疫苗.经口服免疫小鼠后,检测其免疫效果,并用CVB3攻击小鼠,观察其免疫保护作用.结果表明小鼠经1次口服免疫后,血液中即产生了高滴度的抗体;病毒攻击后,免疫小鼠产生了明显的保护作用.
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狂犬病毒pVax-G/N融合基因的克隆及其在酿酒酵母中的表达
目的 构建狂犬病病毒G基因和N基因的融合表达载体,导入酿酒酵母表达系统进行诱导表达,为口服基因疫苗的制备打下基础.方法 以质粒pVax-G为模板扩增狂犬病毒G和N基因,经连接后与酿酒酵母表达载体pYes2连接,测序鉴定后转入酿酒酵母表达菌株INVScI诱导表达pVax-G/N融合蛋白.结果 融合基因pVax-G/N测序结果与预期完全符合,经过半乳糖诱导表达后进行SDS-PAGE电泳和Western- blotting分析,结果表明诱导表达成功.结论 成功构建和表达了融合表达载体pYes2 pVax-G/N,为制备以酿酒酵母为运送载体的口服狂犬病病毒疫苗奠定基础.
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融合基因Tat-HPV16L1的克隆及其在酿酒酵母中的表达
目的 构建人乳头瘤病毒16型L1基因和蛋白转导肽的Tat基因的融合表达载体,导人酿酒酵母表达系统进行诱导表达,为口服基因疫苗的制备打下基础.方法 以pBR322-HPV16质粒为模板扩增L1基因,与酿酒酵母表达载体pYES2连接.重组质粒再与自行设计的蛋白转导功能片段Tat连接,经测序鉴定后转入酿酒酵母表达菌株INVSc1诱导表达Tat-HPV16L1融合蛋白.结果 融合基因Tat-HPV16L1测序结果与预期完全符合,经过半乳糖诱导表达后进行SDS-PAGE电泳和Western blotting分析.结果 表明诱导表达成功.结论 成功构建和表达了融合表达载体pYES2-Tat-HPV16L1,为制备以酿酒酵母为运送载体的口服人乳头瘤病毒疫苗打下基础.
