首页 > 文献资料
-
结核分枝杆菌耐酸机制的研究进展
结核分枝杆菌能在宿主体内长期存活,很大一部分原因是能抵抗吞噬体的酸性环境。细菌一方面能抑制吞噬体与溶酶体融合,干扰吞噬体成熟、酸化过程;另一方面也能通过自身功能抵抗吞噬溶酶体内的酸性杀伤作用。本文主要介绍吞噬体的酸化过程及结核分枝杆菌耐酸机制的新研究进展。
-
Toll样受体2介导的分子信号途径对婴幼鼠巨噬细胞产生细胞因子的影响
目的:探讨婴幼鼠巨噬细胞产生细胞因子功能减弱的分子机制,尤其是Toll样受体2(TLR2)在其中的作用。方法1.腹膜灌洗法分离小鼠腹腔巨噬细胞。2.ELISA法测定细胞因子TNF-α和IL-6。3.流式细胞仪分析细胞TLRs的表达。4.蛋白印迹法(Western blotting)测定信号传导分子P38 MAPK和ERK1/2。结果1.TLR2激动剂酵母提取物刺激后婴幼鼠腹腔巨噬细胞释放细胞因子与成年鼠比较显著减少。2.婴幼鼠与成年鼠腹腔巨噬细胞表面表达的TLR2量差异无统计学意义。3.TLR2激动剂酵母提取物刺激后婴幼鼠腹腔巨噬细胞中信号传导分子P38 MAPK及ERK1/2与成年鼠比较显著减少。4.酵母提取物分别刺激野生型婴幼鼠和成年鼠腹腔巨噬细胞及TLR2-/-型婴幼鼠和成年鼠腹腔巨噬细胞,发现婴幼鼠细胞因子水平差异无统计学意义(野生型和TLR2-/-型比较),成年鼠细胞因子水平差异有统计学意义(野生型和TLR2-/-型比较)。结论 TLRs介导的信号途径缺陷导致婴幼鼠对细菌感染的敏感性增强。
-
Rab蛋白在吞噬体成熟中的作用
吞噬体成熟是指吞噬细胞吞噬病原体形成的吞噬体与溶酶体融合的过程.吞噬体与溶酶体融合后形成吞噬溶酶体,病原菌被溶酶体内的各种水解酶如氧化酶、酸化酶、水解酶等降解杀灭,因此吞噬体成熟是吞噬细胞消灭病原体的关键环节.大量研究发现,Rab GTPases通过介导吞噬体与溶酶体融合及促进吞噬溶酶体酸化在吞噬体的成熟过程中发挥了非常重要的作用.Rab分子异常会影响吞噬体成熟并进而影响细菌的杀灭,导致感染相关疾病的发生.
关键词: 吞噬体 Rab GTPases 细菌清除 细菌逃逸 吞噬溶酶体酸化 -
Ser/Thr蛋白激酶信号转导系统——抗结核药物筛选的新靶点
近的研究表明,Ser/Thr蛋白激酶不只存在于真核生物中,而且也存在于结核分枝杆菌体内.它们构成结核分枝杆菌的信号转导系统,与结核分枝杆菌在宿主体内和体外的生存密切相关.因此,这一信号转导系统可能成为研制新型抗结核药物的靶点.本文就Ser/Thr蛋白激酶信号转导系统及相关蛋白激酶的特征与功能进行了综述.
关键词: 结核分枝杆菌 Ser/Thr蛋白激酶 吞噬体 底物 -
锌离子依赖金属蛋白酶1(Zmp1)抑制小鼠RAW264.7细胞增殖以及吞噬体-溶酶体的融合
目的 观察卡介苗(BCG)的锌离子依赖金属蛋白酶1(Zmp1)对RAW264.7小鼠巨噬细胞的增殖以及吞噬体-溶酶体融合的影响.方法 在大肠杆菌BL21(DE3)中克隆表达Zmp1,用金属螯合磁珠纯化;用纯化的Zmp1处理RAW264.7细胞,采用CCK-8法检测(0、24、48、72、96)h的细胞增殖情况,采用流式细胞术检测细胞周期分布;用减毒沙门菌感染RAW264.7细胞诱导吞噬体形成后,用Zmp1处理细胞,在吞噬体内的减毒沙门菌和溶酶体的溶酶体相关膜蛋白1(LAMP1)分别用相应Alexa Fluor((R)) 350抗沙门菌抗体(蓝色荧光)和Cy5抗LAMP1抗体(红色荧光)标记,通过荧光显微镜观察RAW264.7细胞内两种荧光,将其重合分析吞噬体与溶酶体融合情况.结果 用Zmp1蛋白处理细胞48 h后,细胞增殖活性明显降低;处理48 h后,细胞周期中G1期细胞比例下降,S期比例增高;采用双荧光标记感染沙门菌的RAW264.7细胞,Zmp1处理后显示紫色荧光的吞噬溶酶体融合减少.结论 Zmp1抑制小鼠RAW264.7巨噬细胞增殖,抑制吞噬体-溶酶体融合.
关键词: 锌离子依赖的金属蛋白酶1(Zmp1) 细胞增殖 吞噬体 溶酶体